CAJ | 학술논문

目的:选用膀胱平滑肌细胞为实验细胞,评估细胞外基质/温度敏感性水凝胶复合支架材料的生物相容性.方法:实验于2005-02/05在武汉大学人民医院泌尿外科研究室完成.①实验分组:实验分为4组.细胞外基质/温度敏感性水凝胶复合支架组:细胞外基质/温度敏感性水凝胶复合支架种植平滑肌细胞;单纯细胞外基质组:单纯细胞外基质种植平滑肌细胞;阴性对照组:单纯培养平滑肌细胞;空白对照组:无细胞培养液.②实验操作:种植细胞前先用培养液将支架材料预湿,取第3代兔膀胱平滑肌细胞悬液(1×108 L-1)50μL缓慢接种于材料上.③实验评估:培养2 d后倒置相差显微镜下观察细胞黏附、生长情况以及扫描电镜下观察细胞在材料上的空间生长情况;培养5,10 d取细胞外基质/温度敏感性水凝胶复合支架组、单纯细胞外基质组材料,进行细胞计数,观察细胞黏附数量;培养1,3,5,7 d时MT T法检测细胞的活力.结果:①相差显微镜下可见细胞外基质/温度敏感性水凝胶复合材料为红染的网状结构,纤维较粗,网孔直径较小,未见到细胞碎片;种植平滑肌细胞后6 h,可见细胞紧密黏附于材料表面;种植平滑肌细胞后12 h,可见细胞已伸展,有多个突起;培养3 d时,贴附于材料的细胞数量增加,细胞增殖明显.②扫描电镜下可见发育良好的细胞附于材料上,伪足沿纤维伸展,附着牢固,细胞间连接紧密,可见到细胞外基质分泌.③膀胱平滑肌细胞在单纯细胞外基质上黏附性良好,黏附率为87.6%,复合温度敏感性水凝胶后的细胞外基质表面黏附能力较之增强,黏附率为96.7%.④细胞活力:细胞外基质/温度敏感性水凝胶复合支架组、阴性对照组细胞活力(A)高于单纯细胞外基质组,差异有显著性意义(P＜0.05,0.01),培养1,3,5 d细胞外基质/温度敏感性水凝胶复合支架组细胞活力(A)低于阴性对照组,培养7 d高于阴性对照组,差异有显著性意义(P＜0.05,0.01).结论:细胞外基质/温度敏感性水凝胶复合材料具有便于细胞黏附和生长的微孔结构,生物相容性好,并且保留的某些成分具有良好的促组织再生作用,是一种理想的组织工程材料. 目的:選用膀胱平滑肌細胞為實驗細胞,評估細胞外基質/溫度敏感性水凝膠複閤支架材料的生物相容性.方法:實驗于2005-02/05在武漢大學人民醫院泌尿外科研究室完成.①實驗分組:實驗分為4組.細胞外基質/溫度敏感性水凝膠複閤支架組:細胞外基質/溫度敏感性水凝膠複閤支架種植平滑肌細胞;單純細胞外基質組:單純細胞外基質種植平滑肌細胞;陰性對照組:單純培養平滑肌細胞;空白對照組:無細胞培養液.②實驗操作:種植細胞前先用培養液將支架材料預濕,取第3代兔膀胱平滑肌細胞懸液(1×108 L-1)50μL緩慢接種于材料上.③實驗評估:培養2 d後倒置相差顯微鏡下觀察細胞黏附、生長情況以及掃描電鏡下觀察細胞在材料上的空間生長情況;培養5,10 d取細胞外基質/溫度敏感性水凝膠複閤支架組、單純細胞外基質組材料,進行細胞計數,觀察細胞黏附數量;培養1,3,5,7 d時MT T法檢測細胞的活力.結果:①相差顯微鏡下可見細胞外基質/溫度敏感性水凝膠複閤材料為紅染的網狀結構,纖維較粗,網孔直徑較小,未見到細胞碎片;種植平滑肌細胞後6 h,可見細胞緊密黏附于材料錶麵;種植平滑肌細胞後12 h,可見細胞已伸展,有多箇突起;培養3 d時,貼附于材料的細胞數量增加,細胞增殖明顯.②掃描電鏡下可見髮育良好的細胞附于材料上,偽足沿纖維伸展,附著牢固,細胞間連接緊密,可見到細胞外基質分泌.③膀胱平滑肌細胞在單純細胞外基質上黏附性良好,黏附率為87.6%,複閤溫度敏感性水凝膠後的細胞外基質錶麵黏附能力較之增彊,黏附率為96.7%.④細胞活力:細胞外基質/溫度敏感性水凝膠複閤支架組、陰性對照組細胞活力(A)高于單純細胞外基質組,差異有顯著性意義(P＜0.05,0.01),培養1,3,5 d細胞外基質/溫度敏感性水凝膠複閤支架組細胞活力(A)低于陰性對照組,培養7 d高于陰性對照組,差異有顯著性意義(P＜0.05,0.01).結論:細胞外基質/溫度敏感性水凝膠複閤材料具有便于細胞黏附和生長的微孔結構,生物相容性好,併且保留的某些成分具有良好的促組織再生作用,是一種理想的組織工程材料.
목적:선용방광평활기세포위실험세포,평고세포외기질/온도민감성수응효복합지가재료적생물상용성.방법:실험우2005-02/05재무한대학인민의원비뇨외과연구실완성.①실험분조:실험분위4조.세포외기질/온도민감성수응효복합지가조:세포외기질/온도민감성수응효복합지가충식평활기세포;단순세포외기질조:단순세포외기질충식평활기세포;음성대조조:단순배양평활기세포;공백대조조:무세포배양액.②실험조작:충식세포전선용배양액장지가재료예습,취제3대토방광평활기세포현액(1×108 L-1)50μL완만접충우재료상.③실험평고:배양2 d후도치상차현미경하관찰세포점부、생장정황이급소묘전경하관찰세포재재료상적공간생장정황;배양5,10 d취세포외기질/온도민감성수응효복합지가조、단순세포외기질조재료,진행세포계수,관찰세포점부수량;배양1,3,5,7 d시MT T법검측세포적활력.결과:①상차현미경하가견세포외기질/온도민감성수응효복합재료위홍염적망상결구,섬유교조,망공직경교소,미견도세포쇄편;충식평활기세포후6 h,가견세포긴밀점부우재료표면;충식평활기세포후12 h,가견세포이신전,유다개돌기;배양3 d시,첩부우재료적세포수량증가,세포증식명현.②소묘전경하가견발육량호적세포부우재료상,위족연섬유신전,부착뢰고,세포간련접긴밀,가견도세포외기질분비.③방광평활기세포재단순세포외기질상점부성량호,점부솔위87.6%,복합온도민감성수응효후적세포외기질표면점부능력교지증강,점부솔위96.7%.④세포활력:세포외기질/온도민감성수응효복합지가조、음성대조조세포활력(A)고우단순세포외기질조,차이유현저성의의(P＜0.05,0.01),배양1,3,5 d세포외기질/온도민감성수응효복합지가조세포활력(A)저우음성대조조,배양7 d고우음성대조조,차이유현저성의의(P＜0.05,0.01).결론:세포외기질/온도민감성수응효복합재료구유편우세포점부화생장적미공결구,생물상용성호,병차보류적모사성분구유량호적촉조직재생작용,시일충이상적조직공정재료.