世界华人消化杂志
世界華人消化雜誌
세계화인소화잡지
WORLD CHINESE JOURNAL OF DIGESTOLOGY
2008年
2期
138-143
,共6页
檀英霞%刘志玄%李素波%田曙光%卞丽红%宫锋
檀英霞%劉誌玄%李素波%田曙光%卞麗紅%宮鋒
단영하%류지현%리소파%전서광%변려홍%궁봉
RNA干扰%肝素酶%肝癌%免疫印迹%免疫组化法
RNA榦擾%肝素酶%肝癌%免疫印跡%免疫組化法
RNA간우%간소매%간암%면역인적%면역조화법
目的:采用RNA干扰(RNAi)技术抑制肝癌细胞系HepG2肝素酶(Hpa)的表达,体内观察其对肿瘤生长的抑制作用.方法:以脂质体介导的方法将构建的2个抗Hpa短发卡式RNA(Hpa-shRNA)真核表达载体稳定转染人肝癌细胞株HepG2(高表达Hpa),并设空载体对照组;流式细胞技术鉴定转染稳定性,Western blot及RT-PCR检测肝素酶蛋白和mRNA表达;将干扰组和对照组的肿瘤细胞皮下接种裸鼠,比较各组肿瘤的体质量和体积大小,免疫组化法检测肝素酶在肿瘤组织的表达.结果:与空载体组相比,干扰后的HepG2细胞中Hpa mRNA和蛋白表达明显降低,干扰组裸鼠的肿瘤生长速度明显变慢,统计结果表明干扰组在抑制肿瘤生长方面与空载体组、空白对照组存在显著差异(P＜0.05),两干扰组无显著差异(P＞0.05).结论:应用RNAi技术沉默Hpa基因可以有效下调肝癌肿瘤细胞中Hpa mRNA及蛋白的表达,抑制体内肿瘤生长.
目的:採用RNA榦擾(RNAi)技術抑製肝癌細胞繫HepG2肝素酶(Hpa)的錶達,體內觀察其對腫瘤生長的抑製作用.方法:以脂質體介導的方法將構建的2箇抗Hpa短髮卡式RNA(Hpa-shRNA)真覈錶達載體穩定轉染人肝癌細胞株HepG2(高錶達Hpa),併設空載體對照組;流式細胞技術鑒定轉染穩定性,Western blot及RT-PCR檢測肝素酶蛋白和mRNA錶達;將榦擾組和對照組的腫瘤細胞皮下接種裸鼠,比較各組腫瘤的體質量和體積大小,免疫組化法檢測肝素酶在腫瘤組織的錶達.結果:與空載體組相比,榦擾後的HepG2細胞中Hpa mRNA和蛋白錶達明顯降低,榦擾組裸鼠的腫瘤生長速度明顯變慢,統計結果錶明榦擾組在抑製腫瘤生長方麵與空載體組、空白對照組存在顯著差異(P＜0.05),兩榦擾組無顯著差異(P＞0.05).結論:應用RNAi技術沉默Hpa基因可以有效下調肝癌腫瘤細胞中Hpa mRNA及蛋白的錶達,抑製體內腫瘤生長.
목적:채용RNA간우(RNAi)기술억제간암세포계HepG2간소매(Hpa)적표체,체내관찰기대종류생장적억제작용.방법:이지질체개도적방법장구건적2개항Hpa단발잡식RNA(Hpa-shRNA)진핵표체재체은정전염인간암세포주HepG2(고표체Hpa),병설공재체대조조;류식세포기술감정전염은정성,Western blot급RT-PCR검측간소매단백화mRNA표체;장간우조화대조조적종류세포피하접충라서,비교각조종류적체질량화체적대소,면역조화법검측간소매재종류조직적표체.결과:여공재체조상비,간우후적HepG2세포중Hpa mRNA화단백표체명현강저,간우조라서적종류생장속도명현변만,통계결과표명간우조재억제종류생장방면여공재체조、공백대조조존재현저차이(P＜0.05),량간우조무현저차이(P＞0.05).결론:응용RNAi기술침묵Hpa기인가이유효하조간암종류세포중Hpa mRNA급단백적표체,억제체내종류생장.
