解剖科学进展
解剖科學進展
해부과학진전
PROGRESS OF ANATOMICAL SCIENCES
2011年
2期
168-170
,共3页
β细胞%胰岛细胞培养%胰岛素%SD大鼠
β細胞%胰島細胞培養%胰島素%SD大鼠
β세포%이도세포배양%이도소%SD대서
目的 探讨分离纯化大鼠胰岛素分泌细胞的方法,并评价细胞的生物学特性.方法 选用3～4周龄健康成年SD大鼠,常规外科手术显露SD大鼠胰腺和胆总管,在胆总管内插入4.5～5号头皮针后固定,逆行注入预冷的0.5mg/ml的胶原酶V溶液8～lOml,使胰腺膨胀后迅速取出胰腺放入6mlHanks液中38℃消化lOmin,用含10%胎牛血清的Hanks液终止消化,60目筛网过滤后用Ficoll400非连续梯度离心纯化胰岛.纯化后的细胞用DTZ染色和胰岛素释放试验来分析胰岛素的分泌情况.结果 DTZ染色后β细胞胞浆着色,为均一的猩红色.胰岛细胞分布于Ficoll400浓度为23%～20%和20%～11%的界面之间,纯度高达90%,并且细胞的胰岛素分泌情况良好.结论 胶原酶V消化,Fieoll400纯化是一种简单高效的胰岛素分泌细胞分离纯化的方法,可以获取数量多,活性和纯度好的胰岛素分泌细胞.
目的 探討分離純化大鼠胰島素分泌細胞的方法,併評價細胞的生物學特性.方法 選用3～4週齡健康成年SD大鼠,常規外科手術顯露SD大鼠胰腺和膽總管,在膽總管內插入4.5～5號頭皮針後固定,逆行註入預冷的0.5mg/ml的膠原酶V溶液8～lOml,使胰腺膨脹後迅速取齣胰腺放入6mlHanks液中38℃消化lOmin,用含10%胎牛血清的Hanks液終止消化,60目篩網過濾後用Ficoll400非連續梯度離心純化胰島.純化後的細胞用DTZ染色和胰島素釋放試驗來分析胰島素的分泌情況.結果 DTZ染色後β細胞胞漿著色,為均一的猩紅色.胰島細胞分佈于Ficoll400濃度為23%～20%和20%～11%的界麵之間,純度高達90%,併且細胞的胰島素分泌情況良好.結論 膠原酶V消化,Fieoll400純化是一種簡單高效的胰島素分泌細胞分離純化的方法,可以穫取數量多,活性和純度好的胰島素分泌細胞.
목적 탐토분리순화대서이도소분비세포적방법,병평개세포적생물학특성.방법 선용3～4주령건강성년SD대서,상규외과수술현로SD대서이선화담총관,재담총관내삽입4.5～5호두피침후고정,역행주입예랭적0.5mg/ml적효원매V용액8～lOml,사이선팽창후신속취출이선방입6mlHanks액중38℃소화lOmin,용함10%태우혈청적Hanks액종지소화,60목사망과려후용Ficoll400비련속제도리심순화이도.순화후적세포용DTZ염색화이도소석방시험래분석이도소적분비정황.결과 DTZ염색후β세포포장착색,위균일적성홍색.이도세포분포우Ficoll400농도위23%～20%화20%～11%적계면지간,순도고체90%,병차세포적이도소분비정황량호.결론 효원매V소화,Fieoll400순화시일충간단고효적이도소분비세포분리순화적방법,가이획취수량다,활성화순도호적이도소분비세포.
