中国中西医结合杂志
中國中西醫結閤雜誌
중국중서의결합잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN MEDICINE
2011年
5期
653-658
,共6页
韩向晖%王见义%郑培永%张亚利%尤圣富%季光
韓嚮暉%王見義%鄭培永%張亞利%尤聖富%季光
한향휘%왕견의%정배영%장아리%우골부%계광
清肝活血方%拆方%酒精性肝病%内质网应激%细胞凋亡
清肝活血方%拆方%酒精性肝病%內質網應激%細胞凋亡
청간활혈방%탁방%주정성간병%내질망응격%세포조망
目的 研究中药复方清肝活血方及其拆方抗酒精性肝损伤大鼠肝细胞内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)性凋亡的作用及机制.方法 利用酒精-玉米油-吡唑复合试剂制备大鼠慢性酒精性肝损伤模型.将造模大鼠随机分为模型组、清肝活血方组、清肝方组及活血方组,另设CCl4对照组和正常对照组,每组10只.造模各组大鼠每天上午以酒精复合试剂灌胃,下午各中药组分别给予清肝活血方9.5 g/(kg·d)、清肝方3.0 g/(kg·d)、活血方6.5 s/(kg·d)灌胃,模型组给予等体积生理盐水灌胃;CCl4组每周1次腹腔注射CCl40.3 mL/kg,正常对照组给予生理盐水灌胃,连续治疗2周.组织病理学观察肝脏病理变化;ELISA法检测血清总同型半胱氨酸(total homocysteine,tHCY)水平;流式细胞术检测肝细胞凋亡率;RTPCR和Westemblot法检测大鼠肝脏ERS凋亡相关因子真核生物翻译起始因子(eukaryotic translation initiation factor 2 alpha,eIF-2αa)、磷酸化eIF-2α(p-eIF-2α)、葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GPR78)、Caspase-3基因和蛋白表达.结果 与正常对照组比较,模型大鼠出现了典型的慢性酒精性肝损伤病理改变如脂肪变性、炎症甚至纤维化;肝细胞凋亡明显增加,凋亡率达到了正常大鼠的5倍以上,且以早期凋亡为主;血清tHCY水平显著升高;P-eIF-2α、GRP78及Caspase-3蛋白表达明显增高(P＜0.01);GRP78及Caspase-3 mRNA表达量显著增高(P＜0.01,P＜0.05).与模型组比较,清肝活血方及拆方组大鼠肝损伤及肝细胞凋亡程度明显减轻,血清tHCY水平显著降低,p-eIF-2α、GRP78及Caspase-3蛋白表达明显降低(P＜0.01);清肝活血方组GRP78和Caspase-3 mRNA表达明显降低(P＜0.01,P＜0.05);清肝方组仅GRP78 mRNA表达明显降低(P＜0.05).结论 清肝活血方及其拆方可能通过降低血清tHCY水平及肝脏ERS凋亡相关因子的表达抑制酒精性肝损伤动物肝细胞ERS性凋亡.
目的 研究中藥複方清肝活血方及其拆方抗酒精性肝損傷大鼠肝細胞內質網應激(endoplasmic reticulum stress,ERS)性凋亡的作用及機製.方法 利用酒精-玉米油-吡唑複閤試劑製備大鼠慢性酒精性肝損傷模型.將造模大鼠隨機分為模型組、清肝活血方組、清肝方組及活血方組,另設CCl4對照組和正常對照組,每組10隻.造模各組大鼠每天上午以酒精複閤試劑灌胃,下午各中藥組分彆給予清肝活血方9.5 g/(kg·d)、清肝方3.0 g/(kg·d)、活血方6.5 s/(kg·d)灌胃,模型組給予等體積生理鹽水灌胃;CCl4組每週1次腹腔註射CCl40.3 mL/kg,正常對照組給予生理鹽水灌胃,連續治療2週.組織病理學觀察肝髒病理變化;ELISA法檢測血清總同型半胱氨痠(total homocysteine,tHCY)水平;流式細胞術檢測肝細胞凋亡率;RTPCR和Westemblot法檢測大鼠肝髒ERS凋亡相關因子真覈生物翻譯起始因子(eukaryotic translation initiation factor 2 alpha,eIF-2αa)、燐痠化eIF-2α(p-eIF-2α)、葡萄糖調節蛋白78(glucose-regulated protein 78,GPR78)、Caspase-3基因和蛋白錶達.結果 與正常對照組比較,模型大鼠齣現瞭典型的慢性酒精性肝損傷病理改變如脂肪變性、炎癥甚至纖維化;肝細胞凋亡明顯增加,凋亡率達到瞭正常大鼠的5倍以上,且以早期凋亡為主;血清tHCY水平顯著升高;P-eIF-2α、GRP78及Caspase-3蛋白錶達明顯增高(P＜0.01);GRP78及Caspase-3 mRNA錶達量顯著增高(P＜0.01,P＜0.05).與模型組比較,清肝活血方及拆方組大鼠肝損傷及肝細胞凋亡程度明顯減輕,血清tHCY水平顯著降低,p-eIF-2α、GRP78及Caspase-3蛋白錶達明顯降低(P＜0.01);清肝活血方組GRP78和Caspase-3 mRNA錶達明顯降低(P＜0.01,P＜0.05);清肝方組僅GRP78 mRNA錶達明顯降低(P＜0.05).結論 清肝活血方及其拆方可能通過降低血清tHCY水平及肝髒ERS凋亡相關因子的錶達抑製酒精性肝損傷動物肝細胞ERS性凋亡.
목적 연구중약복방청간활혈방급기탁방항주정성간손상대서간세포내질망응격(endoplasmic reticulum stress,ERS)성조망적작용급궤제.방법 이용주정-옥미유-필서복합시제제비대서만성주정성간손상모형.장조모대서수궤분위모형조、청간활혈방조、청간방조급활혈방조,령설CCl4대조조화정상대조조,매조10지.조모각조대서매천상오이주정복합시제관위,하오각중약조분별급여청간활혈방9.5 g/(kg·d)、청간방3.0 g/(kg·d)、활혈방6.5 s/(kg·d)관위,모형조급여등체적생리염수관위;CCl4조매주1차복강주사CCl40.3 mL/kg,정상대조조급여생리염수관위,련속치료2주.조직병이학관찰간장병리변화;ELISA법검측혈청총동형반광안산(total homocysteine,tHCY)수평;류식세포술검측간세포조망솔;RTPCR화Westemblot법검측대서간장ERS조망상관인자진핵생물번역기시인자(eukaryotic translation initiation factor 2 alpha,eIF-2αa)、린산화eIF-2α(p-eIF-2α)、포도당조절단백78(glucose-regulated protein 78,GPR78)、Caspase-3기인화단백표체.결과 여정상대조조비교,모형대서출현료전형적만성주정성간손상병리개변여지방변성、염증심지섬유화;간세포조망명현증가,조망솔체도료정상대서적5배이상,차이조기조망위주;혈청tHCY수평현저승고;P-eIF-2α、GRP78급Caspase-3단백표체명현증고(P＜0.01);GRP78급Caspase-3 mRNA표체량현저증고(P＜0.01,P＜0.05).여모형조비교,청간활혈방급탁방조대서간손상급간세포조망정도명현감경,혈청tHCY수평현저강저,p-eIF-2α、GRP78급Caspase-3단백표체명현강저(P＜0.01);청간활혈방조GRP78화Caspase-3 mRNA표체명현강저(P＜0.01,P＜0.05);청간방조부GRP78 mRNA표체명현강저(P＜0.05).결론 청간활혈방급기탁방가능통과강저혈청tHCY수평급간장ERS조망상관인자적표체억제주정성간손상동물간세포ERS성조망.
