脊柱外科杂志
脊柱外科雜誌
척주외과잡지
JOURNAL OF SPINE SURGERY
2011年
4期
244-248
,共5页
杨勇%梁伟%罗卓荆%张世磊%陶惠人
楊勇%樑偉%囉卓荊%張世磊%陶惠人
양용%량위%라탁형%장세뢰%도혜인
腰椎%椎间盘%细胞培养技术
腰椎%椎間盤%細胞培養技術
요추%추간반%세포배양기술
目的 比较不同Pfirmiann分级椎间盘内髓核细胞的生物学特性,验证腰椎间盘退变Pfirrmann分级能否反应髓核组织在细胞水平的退变程度.方法 取术中获得的患者的髓核组织,按腰椎椎间盘退变Pfrrmann分级标准进行分组.组织切片甲苯胺蓝观察比较各组髓核内细胞的密度.采用酶消化法分离培养髓核细胞.台盼蓝染色计算各组细胞活性比率,光镜观察细胞形态,透射电镜观察细胞的超微结构.MTT法绘制各组2代细胞的生长曲线.阿利辛蓝法检测各组细胞的蛋白聚糖含量,比较各组差异.结果 随退变级别升高,标本内胶冻样物质含量减少,透明度降低,纤维化组织增多,V级标本完全纤维化,并伴有钙化,无法区分髓核组织.I级和Ⅱ级髓核内细胞密度明显高于Ⅲ级,Ⅳ级又明显高于Ⅳ级.I级组髓核细胞的活性比率为(93.5±3.7)%;Ⅱ级组细胞活性比率为(91.6±4.3)%;Ⅲ级组细胞活性比率为(83.5±6.7)%;IV级组细胞活性比率为(74.8±5.9)%.除I级与Ⅱ级比较差异无统计学意义外,其余各组两两比较差异均具有统计学意义(P<0.05).光镜下I级和Ⅱ级组细胞呈短梭形或多角形轮廓清晰饱满,折光性强.Ⅲ级组胞突较长,Ⅳ级组胞突更长,细胞轮廓模糊.电镜下I级和Ⅱ级组细胞相似,胞浆内含有大量粗面内质网和线粒体,Ⅲ级组细胞内的粗面内质网和线粒体减少,出现小的空泡,可见溶酶体出现.Ⅳ级组细胞溶酶体大量聚集,可见巨大的空泡样结构.I级组和Ⅱ级组细胞生长速率快于Ⅲ级组(P<0.01)).Ⅲ级组细胞生长速率快于1V级组(P<0.05).I、Ⅱ、Ⅲ、IV组细胞GAG 含量分别为(423.19±41.21)mg/L,(408.23±29.25)mg/L,(273.05±52.44)mg/L、(91.73±38.06)mg/L,I级组和Ⅱ级组细胞高于于Ⅲ级组(P<0.05)).Ⅲ级组细胞高于IV级组(P<0.05).结论 椎间盘退变的Pfirrmann分级,能很好的反映髓核组织在细胞水平的退变程度.是一种简单有效的退变分级系统.
目的 比較不同Pfirmiann分級椎間盤內髓覈細胞的生物學特性,驗證腰椎間盤退變Pfirrmann分級能否反應髓覈組織在細胞水平的退變程度.方法 取術中穫得的患者的髓覈組織,按腰椎椎間盤退變Pfrrmann分級標準進行分組.組織切片甲苯胺藍觀察比較各組髓覈內細胞的密度.採用酶消化法分離培養髓覈細胞.檯盼藍染色計算各組細胞活性比率,光鏡觀察細胞形態,透射電鏡觀察細胞的超微結構.MTT法繪製各組2代細胞的生長麯線.阿利辛藍法檢測各組細胞的蛋白聚糖含量,比較各組差異.結果 隨退變級彆升高,標本內膠凍樣物質含量減少,透明度降低,纖維化組織增多,V級標本完全纖維化,併伴有鈣化,無法區分髓覈組織.I級和Ⅱ級髓覈內細胞密度明顯高于Ⅲ級,Ⅳ級又明顯高于Ⅳ級.I級組髓覈細胞的活性比率為(93.5±3.7)%;Ⅱ級組細胞活性比率為(91.6±4.3)%;Ⅲ級組細胞活性比率為(83.5±6.7)%;IV級組細胞活性比率為(74.8±5.9)%.除I級與Ⅱ級比較差異無統計學意義外,其餘各組兩兩比較差異均具有統計學意義(P<0.05).光鏡下I級和Ⅱ級組細胞呈短梭形或多角形輪廓清晰飽滿,摺光性彊.Ⅲ級組胞突較長,Ⅳ級組胞突更長,細胞輪廓模糊.電鏡下I級和Ⅱ級組細胞相似,胞漿內含有大量粗麵內質網和線粒體,Ⅲ級組細胞內的粗麵內質網和線粒體減少,齣現小的空泡,可見溶酶體齣現.Ⅳ級組細胞溶酶體大量聚集,可見巨大的空泡樣結構.I級組和Ⅱ級組細胞生長速率快于Ⅲ級組(P<0.01)).Ⅲ級組細胞生長速率快于1V級組(P<0.05).I、Ⅱ、Ⅲ、IV組細胞GAG 含量分彆為(423.19±41.21)mg/L,(408.23±29.25)mg/L,(273.05±52.44)mg/L、(91.73±38.06)mg/L,I級組和Ⅱ級組細胞高于于Ⅲ級組(P<0.05)).Ⅲ級組細胞高于IV級組(P<0.05).結論 椎間盤退變的Pfirrmann分級,能很好的反映髓覈組織在細胞水平的退變程度.是一種簡單有效的退變分級繫統.
목적 비교불동Pfirmiann분급추간반내수핵세포적생물학특성,험증요추간반퇴변Pfirrmann분급능부반응수핵조직재세포수평적퇴변정도.방법 취술중획득적환자적수핵조직,안요추추간반퇴변Pfrrmann분급표준진행분조.조직절편갑분알람관찰비교각조수핵내세포적밀도.채용매소화법분리배양수핵세포.태반람염색계산각조세포활성비솔,광경관찰세포형태,투사전경관찰세포적초미결구.MTT법회제각조2대세포적생장곡선.아리신람법검측각조세포적단백취당함량,비교각조차이.결과 수퇴변급별승고,표본내효동양물질함량감소,투명도강저,섬유화조직증다,V급표본완전섬유화,병반유개화,무법구분수핵조직.I급화Ⅱ급수핵내세포밀도명현고우Ⅲ급,Ⅳ급우명현고우Ⅳ급.I급조수핵세포적활성비솔위(93.5±3.7)%;Ⅱ급조세포활성비솔위(91.6±4.3)%;Ⅲ급조세포활성비솔위(83.5±6.7)%;IV급조세포활성비솔위(74.8±5.9)%.제I급여Ⅱ급비교차이무통계학의의외,기여각조량량비교차이균구유통계학의의(P<0.05).광경하I급화Ⅱ급조세포정단사형혹다각형륜곽청석포만,절광성강.Ⅲ급조포돌교장,Ⅳ급조포돌경장,세포륜곽모호.전경하I급화Ⅱ급조세포상사,포장내함유대량조면내질망화선립체,Ⅲ급조세포내적조면내질망화선립체감소,출현소적공포,가견용매체출현.Ⅳ급조세포용매체대량취집,가견거대적공포양결구.I급조화Ⅱ급조세포생장속솔쾌우Ⅲ급조(P<0.01)).Ⅲ급조세포생장속솔쾌우1V급조(P<0.05).I、Ⅱ、Ⅲ、IV조세포GAG 함량분별위(423.19±41.21)mg/L,(408.23±29.25)mg/L,(273.05±52.44)mg/L、(91.73±38.06)mg/L,I급조화Ⅱ급조세포고우우Ⅲ급조(P<0.05)).Ⅲ급조세포고우IV급조(P<0.05).결론 추간반퇴변적Pfirrmann분급,능흔호적반영수핵조직재세포수평적퇴변정도.시일충간단유효적퇴변분급계통.