热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2011年
6期
1106-1110
,共5页
黄必旺%谢宇飞%沙莉%黄志鹏
黃必旺%謝宇飛%沙莉%黃誌鵬
황필왕%사우비%사리%황지붕
苏云金芽孢杆菌%几丁质酶%基因表达%酶活性
囌雲金芽孢桿菌%幾丁質酶%基因錶達%酶活性
소운금아포간균%궤정질매%기인표체%매활성
通过PCR方法从苏云金芽孢杆菌010菌株克隆出几丁质酶基因chi36,该基因开放阅读框(ORF)的长度为1 083 bp,编码360个氨基酸.氨基酸序列分析表明:Bt 010的Chi36与Bt 15A3、Bc 28-9、Bc 6E1的Chi36相似性分别为99％、99％和96％,其N-端具有27个氨基酸的信号肽序列.该蛋白归类为18家族几丁质酶,属于一种胞外酶.将chi36基因插入到PGEX-KG原核表达载体的表达框中,构建成原核表达载体并转化到大肠杆菌E.coli BL21(DE3)进行蛋白表达,酶活性测定结果表明,表达产物对几丁质有降解作用,在pH值为5.0、温度为55℃时酶活性最高.
通過PCR方法從囌雲金芽孢桿菌010菌株剋隆齣幾丁質酶基因chi36,該基因開放閱讀框(ORF)的長度為1 083 bp,編碼360箇氨基痠.氨基痠序列分析錶明:Bt 010的Chi36與Bt 15A3、Bc 28-9、Bc 6E1的Chi36相似性分彆為99％、99％和96％,其N-耑具有27箇氨基痠的信號肽序列.該蛋白歸類為18傢族幾丁質酶,屬于一種胞外酶.將chi36基因插入到PGEX-KG原覈錶達載體的錶達框中,構建成原覈錶達載體併轉化到大腸桿菌E.coli BL21(DE3)進行蛋白錶達,酶活性測定結果錶明,錶達產物對幾丁質有降解作用,在pH值為5.0、溫度為55℃時酶活性最高.
통과PCR방법종소운금아포간균010균주극륭출궤정질매기인chi36,해기인개방열독광(ORF)적장도위1 083 bp,편마360개안기산.안기산서렬분석표명:Bt 010적Chi36여Bt 15A3、Bc 28-9、Bc 6E1적Chi36상사성분별위99％、99％화96％,기N-단구유27개안기산적신호태서렬.해단백귀류위18가족궤정질매,속우일충포외매.장chi36기인삽입도PGEX-KG원핵표체재체적표체광중,구건성원핵표체재체병전화도대장간균E.coli BL21(DE3)진행단백표체,매활성측정결과표명,표체산물대궤정질유강해작용,재pH치위5.0、온도위55℃시매활성최고.
