科学技术与工程
科學技術與工程
과학기술여공정
SCIENCE TECHNOLOGY AND ENGINEERING
2012年
5期
1017-1019,1029
,共4页
江鹰%尚淑琴%赵勇%毛峰峰%赵善民%张彩勤%师长宏
江鷹%尚淑琴%趙勇%毛峰峰%趙善民%張綵勤%師長宏
강응%상숙금%조용%모봉봉%조선민%장채근%사장굉
结核分枝杆菌%CFP10%表达%纯化
結覈分枝桿菌%CFP10%錶達%純化
결핵분지간균%CFP10%표체%순화
克隆结核分枝杆菌培养滤液蛋白CFP10基因,并在大肠杆菌中进行表达和纯化.用PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组扩增出CFP10基因片段,克隆至pMD18-T载体中,序列测定正确后,将其亚克隆到表达载体pGEX-4T-1并在大肠杆菌BL21中表达.表达蛋白经SDS-PAG及Western-blot分析后,亲和层析法纯化蛋白.成功克隆了CFP10基因,并对其在E.coli中进行了表达,SDS-PAGE及Western blot分析表明表达产物正确.通过GST纯化系统获得36 kD纯化蛋白,与文献报道相符,该蛋白可与CFP10 mAb特异结合,并且同时与活动期结核病人血清发生反应.成功获得了纯化的CFP10蛋白,为进一步研究CFP10蛋白的致病机理提供了实验依据.
剋隆結覈分枝桿菌培養濾液蛋白CFP10基因,併在大腸桿菌中進行錶達和純化.用PCR方法從結覈分枝桿菌H37Rv基因組擴增齣CFP10基因片段,剋隆至pMD18-T載體中,序列測定正確後,將其亞剋隆到錶達載體pGEX-4T-1併在大腸桿菌BL21中錶達.錶達蛋白經SDS-PAG及Western-blot分析後,親和層析法純化蛋白.成功剋隆瞭CFP10基因,併對其在E.coli中進行瞭錶達,SDS-PAGE及Western blot分析錶明錶達產物正確.通過GST純化繫統穫得36 kD純化蛋白,與文獻報道相符,該蛋白可與CFP10 mAb特異結閤,併且同時與活動期結覈病人血清髮生反應.成功穫得瞭純化的CFP10蛋白,為進一步研究CFP10蛋白的緻病機理提供瞭實驗依據.
극륭결핵분지간균배양려액단백CFP10기인,병재대장간균중진행표체화순화.용PCR방법종결핵분지간균H37Rv기인조확증출CFP10기인편단,극륭지pMD18-T재체중,서렬측정정학후,장기아극륭도표체재체pGEX-4T-1병재대장간균BL21중표체.표체단백경SDS-PAG급Western-blot분석후,친화층석법순화단백.성공극륭료CFP10기인,병대기재E.coli중진행료표체,SDS-PAGE급Western blot분석표명표체산물정학.통과GST순화계통획득36 kD순화단백,여문헌보도상부,해단백가여CFP10 mAb특이결합,병차동시여활동기결핵병인혈청발생반응.성공획득료순화적CFP10단백,위진일보연구CFP10단백적치병궤리제공료실험의거.
