中华外科杂志
中華外科雜誌
중화외과잡지
CHINESE JOURNAL OF SURGERY
2005年
3期
153-156
,共4页
陈汝福%李志花%陈积圣%孔宪和%邹声泉
陳汝福%李誌花%陳積聖%孔憲和%鄒聲泉
진여복%리지화%진적골%공헌화%추성천
胆管肿瘤%丙型肝炎%病毒核心蛋白%细胞转染
膽管腫瘤%丙型肝炎%病毒覈心蛋白%細胞轉染
담관종류%병형간염%병독핵심단백%세포전염
目的探讨丙型肝炎病毒核心蛋白(HCV-C)对人胆管上皮细胞(BEC)的转化及致癌作用.方法通过脂质体介导将含有HCV-C基因重组真核表达载体pcDNA HCV-C导入BEC细胞,G418筛选表达目的基因的细胞;聚合酶链反应(PCR)及免疫组织化学SABC法检测细胞中HCV-C 基因及蛋白的表达;细胞计数、锚着非依赖性生长实验、成瘤性检测等鉴定其生物学行为变化,免疫组织化学SABC法检测所致肿瘤组织中HCV-C蛋白表达.结果 HCV-C转染的BEC 细胞中HCV-C蛋白表达于胞质,质粒pcDNA HCV-C转染细胞的倍增时间较pcDNA3转染细胞和未转染BEC细胞明显缩短(分别为14 h,28 h,30 h).pcDNA HCV-C和pcDNA3转染细胞及未转染BEC在软琼脂中的克隆形成率分别为36.0%、2.5%和1.5% (P<0.01).3种细胞接种裸鼠后,pcDNA HCV-C转染细胞注射组出现肿瘤,病理学检查证实为胆管细胞癌,肿瘤组织有HCV-C蛋白的表达.而pcDNA3转染细胞及未转染BEC细胞注射组在注射36 d后仍未见肿瘤发生.结论 HCV-C 蛋白具有促胆管细胞转化和促进肿瘤发生的作用.
目的探討丙型肝炎病毒覈心蛋白(HCV-C)對人膽管上皮細胞(BEC)的轉化及緻癌作用.方法通過脂質體介導將含有HCV-C基因重組真覈錶達載體pcDNA HCV-C導入BEC細胞,G418篩選錶達目的基因的細胞;聚閤酶鏈反應(PCR)及免疫組織化學SABC法檢測細胞中HCV-C 基因及蛋白的錶達;細胞計數、錨著非依賴性生長實驗、成瘤性檢測等鑒定其生物學行為變化,免疫組織化學SABC法檢測所緻腫瘤組織中HCV-C蛋白錶達.結果 HCV-C轉染的BEC 細胞中HCV-C蛋白錶達于胞質,質粒pcDNA HCV-C轉染細胞的倍增時間較pcDNA3轉染細胞和未轉染BEC細胞明顯縮短(分彆為14 h,28 h,30 h).pcDNA HCV-C和pcDNA3轉染細胞及未轉染BEC在軟瓊脂中的剋隆形成率分彆為36.0%、2.5%和1.5% (P<0.01).3種細胞接種裸鼠後,pcDNA HCV-C轉染細胞註射組齣現腫瘤,病理學檢查證實為膽管細胞癌,腫瘤組織有HCV-C蛋白的錶達.而pcDNA3轉染細胞及未轉染BEC細胞註射組在註射36 d後仍未見腫瘤髮生.結論 HCV-C 蛋白具有促膽管細胞轉化和促進腫瘤髮生的作用.
목적탐토병형간염병독핵심단백(HCV-C)대인담관상피세포(BEC)적전화급치암작용.방법통과지질체개도장함유HCV-C기인중조진핵표체재체pcDNA HCV-C도입BEC세포,G418사선표체목적기인적세포;취합매련반응(PCR)급면역조직화학SABC법검측세포중HCV-C 기인급단백적표체;세포계수、묘착비의뢰성생장실험、성류성검측등감정기생물학행위변화,면역조직화학SABC법검측소치종류조직중HCV-C단백표체.결과 HCV-C전염적BEC 세포중HCV-C단백표체우포질,질립pcDNA HCV-C전염세포적배증시간교pcDNA3전염세포화미전염BEC세포명현축단(분별위14 h,28 h,30 h).pcDNA HCV-C화pcDNA3전염세포급미전염BEC재연경지중적극륭형성솔분별위36.0%、2.5%화1.5% (P<0.01).3충세포접충라서후,pcDNA HCV-C전염세포주사조출현종류,병이학검사증실위담관세포암,종류조직유HCV-C단백적표체.이pcDNA3전염세포급미전염BEC세포주사조재주사36 d후잉미견종류발생.결론 HCV-C 단백구유촉담관세포전화화촉진종류발생적작용.