天津医药
天津醫藥
천진의약
TIANJIN MEDICAL JOURNAL
2008年
7期
527-529
,共3页
张佩兰%程焱%王旭光%张辰昊
張珮蘭%程焱%王旭光%張辰昊
장패란%정염%왕욱광%장신호
小脑共济失调%遗传性疾病,先天性%RNA,信使%Wdl小鼠%Car8蛋白%IP3R1蛋白
小腦共濟失調%遺傳性疾病,先天性%RNA,信使%Wdl小鼠%Car8蛋白%IP3R1蛋白
소뇌공제실조%유전성질병,선천성%RNA,신사%Wdl소서%Car8단백%IP3R1단백
目的:探讨引起Waddles(Wdl)小鼠遗传性小脑性共济失调的分子机制.方法:采用成年2～4个月的Wdl小鼠30只和同等数量同胎生的正常小鼠进行试验.对从Wdl小鼠和正常小鼠提取的mRNA进行Northern杂交;使用亲和法提纯的家兔的CAR8蛋白多克隆抗体进行Western blot分析;应用免疫组织化学方法研究Wdl小鼠CAR8蛋白是否缺乏.结果:Wdl小鼠的Car8基因转录水平明显降低,而+/Wdl小鼠Car8基因的转录水平介于正常和Wdl小鼠之间.在正常和+/Wdl小鼠的小脑细胞中可见CAR8蛋白的表达且表达量相似,而在Wdl小鼠的小脑细胞中则不能探查到CAR8蛋白的表达.在正常、杂合子及Wdl小鼠,1,4,5-三磷酸肌酸受体1(IP3R1)蛋白表达无明显差别.正常小鼠的CAR8和IP3R1蛋白在小脑细胞中的位置相同,而在Wdl小鼠的小脑细胞中,仅IP3R1蛋白的位置与正常小鼠相同,但检测不到CAR8蛋白.结论:Wdl小鼠Car8基因突变可改变其基因表达,并导致转录水平下调及蛋白质翻译障碍.
目的:探討引起Waddles(Wdl)小鼠遺傳性小腦性共濟失調的分子機製.方法:採用成年2～4箇月的Wdl小鼠30隻和同等數量同胎生的正常小鼠進行試驗.對從Wdl小鼠和正常小鼠提取的mRNA進行Northern雜交;使用親和法提純的傢兔的CAR8蛋白多剋隆抗體進行Western blot分析;應用免疫組織化學方法研究Wdl小鼠CAR8蛋白是否缺乏.結果:Wdl小鼠的Car8基因轉錄水平明顯降低,而+/Wdl小鼠Car8基因的轉錄水平介于正常和Wdl小鼠之間.在正常和+/Wdl小鼠的小腦細胞中可見CAR8蛋白的錶達且錶達量相似,而在Wdl小鼠的小腦細胞中則不能探查到CAR8蛋白的錶達.在正常、雜閤子及Wdl小鼠,1,4,5-三燐痠肌痠受體1(IP3R1)蛋白錶達無明顯差彆.正常小鼠的CAR8和IP3R1蛋白在小腦細胞中的位置相同,而在Wdl小鼠的小腦細胞中,僅IP3R1蛋白的位置與正常小鼠相同,但檢測不到CAR8蛋白.結論:Wdl小鼠Car8基因突變可改變其基因錶達,併導緻轉錄水平下調及蛋白質翻譯障礙.
목적:탐토인기Waddles(Wdl)소서유전성소뇌성공제실조적분자궤제.방법:채용성년2～4개월적Wdl소서30지화동등수량동태생적정상소서진행시험.대종Wdl소서화정상소서제취적mRNA진행Northern잡교;사용친화법제순적가토적CAR8단백다극륭항체진행Western blot분석;응용면역조직화학방법연구Wdl소서CAR8단백시부결핍.결과:Wdl소서적Car8기인전록수평명현강저,이+/Wdl소서Car8기인적전록수평개우정상화Wdl소서지간.재정상화+/Wdl소서적소뇌세포중가견CAR8단백적표체차표체량상사,이재Wdl소서적소뇌세포중칙불능탐사도CAR8단백적표체.재정상、잡합자급Wdl소서,1,4,5-삼린산기산수체1(IP3R1)단백표체무명현차별.정상소서적CAR8화IP3R1단백재소뇌세포중적위치상동,이재Wdl소서적소뇌세포중,부IP3R1단백적위치여정상소서상동,단검측불도CAR8단백.결론:Wdl소서Car8기인돌변가개변기기인표체,병도치전록수평하조급단백질번역장애.
