中华肿瘤防治杂志
中華腫瘤防治雜誌
중화종류방치잡지
CHINESE JOURNAL OF CANCER PREVENTION AND TREATMENT
2008年
6期
419-422,433
,共5页
刘海波%毕建斌%孔垂泽%刘贤奎%姜元军%杨春明%杨建勋
劉海波%畢建斌%孔垂澤%劉賢奎%薑元軍%楊春明%楊建勛
류해파%필건빈%공수택%류현규%강원군%양춘명%양건훈
膀胱肿瘤%基因,Livin%细胞增殖%细胞凋亡
膀胱腫瘤%基因,Livin%細胞增殖%細胞凋亡
방광종류%기인,Livin%세포증식%세포조망
目的:观察凋亡抑制蛋白Livin对于膀胱癌细胞系增殖和凋亡的影响.方法:采用脂质体转染法将Livin基因转入膀胱癌T24细胞系,经G418筛选后获得稳定表达Livin的亚克隆细胞系T24/Livin+及仅转染载体的T24/pcDNA3.1(+).应用Western blot RT-PCR法来检测Livin 在转染细胞中的表达;应用克隆形成试验检测细胞增殖活性;用丝裂霉素C(mitomycin C,MMC)分别作用转染前后的膀胱癌细胞系24 h,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测转染前后细胞生长抑制率,应用流式细胞仪(FCM)及吖啶橙(AO)染色检测细胞凋亡.结果:成功建立了稳定表达Livin的亚克隆细胞系T24/Livin+及T24/pcDNA3.1(+).Western blot及RT-PCR法检测结果表明Livin在T24/Livin+中表达阳性,而在T24与T24/pcDNA3.1(+)中表达阴性.Livin的表达导致了膀胱癌细胞系更强的细胞增殖能力(P<0.01); 经MMC作用24 h后,T24/pcDNA3.1(+)与T24的细胞凋亡率分别为(21.38±2.27)%和(19.60±2.31)%,而T24/Livin+的细胞凋亡率则为(8.65±1.47)%,Livin表达阳性的细胞较阴性组的细胞凋亡率明显减少,差异有统计学意义,P<0.01.结论:Livin基因在膀胱癌细胞系T24中可以诱导细胞增殖,并赋予其在化疗中具有更强的抗凋亡能力.
目的:觀察凋亡抑製蛋白Livin對于膀胱癌細胞繫增殖和凋亡的影響.方法:採用脂質體轉染法將Livin基因轉入膀胱癌T24細胞繫,經G418篩選後穫得穩定錶達Livin的亞剋隆細胞繫T24/Livin+及僅轉染載體的T24/pcDNA3.1(+).應用Western blot RT-PCR法來檢測Livin 在轉染細胞中的錶達;應用剋隆形成試驗檢測細胞增殖活性;用絲裂黴素C(mitomycin C,MMC)分彆作用轉染前後的膀胱癌細胞繫24 h,應用四甲基偶氮唑藍(MTT)比色法檢測轉染前後細胞生長抑製率,應用流式細胞儀(FCM)及吖啶橙(AO)染色檢測細胞凋亡.結果:成功建立瞭穩定錶達Livin的亞剋隆細胞繫T24/Livin+及T24/pcDNA3.1(+).Western blot及RT-PCR法檢測結果錶明Livin在T24/Livin+中錶達暘性,而在T24與T24/pcDNA3.1(+)中錶達陰性.Livin的錶達導緻瞭膀胱癌細胞繫更彊的細胞增殖能力(P<0.01); 經MMC作用24 h後,T24/pcDNA3.1(+)與T24的細胞凋亡率分彆為(21.38±2.27)%和(19.60±2.31)%,而T24/Livin+的細胞凋亡率則為(8.65±1.47)%,Livin錶達暘性的細胞較陰性組的細胞凋亡率明顯減少,差異有統計學意義,P<0.01.結論:Livin基因在膀胱癌細胞繫T24中可以誘導細胞增殖,併賦予其在化療中具有更彊的抗凋亡能力.
목적:관찰조망억제단백Livin대우방광암세포계증식화조망적영향.방법:채용지질체전염법장Livin기인전입방광암T24세포계,경G418사선후획득은정표체Livin적아극륭세포계T24/Livin+급부전염재체적T24/pcDNA3.1(+).응용Western blot RT-PCR법래검측Livin 재전염세포중적표체;응용극륭형성시험검측세포증식활성;용사렬매소C(mitomycin C,MMC)분별작용전염전후적방광암세포계24 h,응용사갑기우담서람(MTT)비색법검측전염전후세포생장억제솔,응용류식세포의(FCM)급아정등(AO)염색검측세포조망.결과:성공건립료은정표체Livin적아극륭세포계T24/Livin+급T24/pcDNA3.1(+).Western blot급RT-PCR법검측결과표명Livin재T24/Livin+중표체양성,이재T24여T24/pcDNA3.1(+)중표체음성.Livin적표체도치료방광암세포계경강적세포증식능력(P<0.01); 경MMC작용24 h후,T24/pcDNA3.1(+)여T24적세포조망솔분별위(21.38±2.27)%화(19.60±2.31)%,이T24/Livin+적세포조망솔칙위(8.65±1.47)%,Livin표체양성적세포교음성조적세포조망솔명현감소,차이유통계학의의,P<0.01.결론:Livin기인재방광암세포계T24중가이유도세포증식,병부여기재화료중구유경강적항조망능력.