中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2008年
4期
298-301,307
,共5页
肺炎链球菌%补体结合蛋白%纯化%免疫效果
肺炎鏈毬菌%補體結閤蛋白%純化%免疫效果
폐염련구균%보체결합단백%순화%면역효과
目的 对9V型肺炎链球菌补体结合蛋白C3-BP进行纯化及免疫效果分析.方法 通过三氧醋酸沉淀、离子交换层析、凝胶过滤层析和亲和层析等方法,从9V型肺炎链球菌培养上清中提取C3-BP,Lowry法检测其浓度,SDS-PAGE检测其纯度及大小,Westem blot检测其补体C3结合活性.将纯化蛋白免疫NIH小鼠,ELJSA法测定小鼠血清IgG抗体,MTT法测定小鼠脾淋巴细胞增殖情况,活菌攻击,检测其交叉保护效果.结果 经纯化的表面蛋白C3-BP,其相对分子质量约为90 000,为单链蛋白,浓度为0.21 mg/ml,纯度为90.7%,具有与补体C3结合的特性.免疫小鼠后,抗体滴度达到1:38 802.免疫组小鼠脾脏与胸腺淋巴细胞代谢活性明显增强,与对照组相比,二者刺激指数之间差异有显著意义.9V型C3-BP免疫小鼠后,不仅对9V型肺炎链球菌株有保护作用,对2型、6B型和14型肺炎链球菌菌株也有保护作用.结论 摸索出了一种纯化肺炎链球菌表面蛋白C3-BP的方法,纯化的C3-BP具有不依赖血清型的交叉保护作用,而且体液免疫及细胞免疫效果良好.
目的 對9V型肺炎鏈毬菌補體結閤蛋白C3-BP進行純化及免疫效果分析.方法 通過三氧醋痠沉澱、離子交換層析、凝膠過濾層析和親和層析等方法,從9V型肺炎鏈毬菌培養上清中提取C3-BP,Lowry法檢測其濃度,SDS-PAGE檢測其純度及大小,Westem blot檢測其補體C3結閤活性.將純化蛋白免疫NIH小鼠,ELJSA法測定小鼠血清IgG抗體,MTT法測定小鼠脾淋巴細胞增殖情況,活菌攻擊,檢測其交扠保護效果.結果 經純化的錶麵蛋白C3-BP,其相對分子質量約為90 000,為單鏈蛋白,濃度為0.21 mg/ml,純度為90.7%,具有與補體C3結閤的特性.免疫小鼠後,抗體滴度達到1:38 802.免疫組小鼠脾髒與胸腺淋巴細胞代謝活性明顯增彊,與對照組相比,二者刺激指數之間差異有顯著意義.9V型C3-BP免疫小鼠後,不僅對9V型肺炎鏈毬菌株有保護作用,對2型、6B型和14型肺炎鏈毬菌菌株也有保護作用.結論 摸索齣瞭一種純化肺炎鏈毬菌錶麵蛋白C3-BP的方法,純化的C3-BP具有不依賴血清型的交扠保護作用,而且體液免疫及細胞免疫效果良好.
목적 대9V형폐염련구균보체결합단백C3-BP진행순화급면역효과분석.방법 통과삼양작산침정、리자교환층석、응효과려층석화친화층석등방법,종9V형폐염련구균배양상청중제취C3-BP,Lowry법검측기농도,SDS-PAGE검측기순도급대소,Westem blot검측기보체C3결합활성.장순화단백면역NIH소서,ELJSA법측정소서혈청IgG항체,MTT법측정소서비림파세포증식정황,활균공격,검측기교차보호효과.결과 경순화적표면단백C3-BP,기상대분자질량약위90 000,위단련단백,농도위0.21 mg/ml,순도위90.7%,구유여보체C3결합적특성.면역소서후,항체적도체도1:38 802.면역조소서비장여흉선림파세포대사활성명현증강,여대조조상비,이자자격지수지간차이유현저의의.9V형C3-BP면역소서후,불부대9V형폐염련구균주유보호작용,대2형、6B형화14형폐염련구균균주야유보호작용.결론 모색출료일충순화폐염련구균표면단백C3-BP적방법,순화적C3-BP구유불의뢰혈청형적교차보호작용,이차체액면역급세포면역효과량호.
