暨南大学学报(自然科学与医学版)
暨南大學學報(自然科學與醫學版)
기남대학학보(자연과학여의학판)
JOURNAL OF JINAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE & MEDICINE EDITION)
2009年
4期
349-354
,共6页
王笑迎%欧阳东云%何贤辉%徐丽慧%施焕敬%高琦%郭贺
王笑迎%歐暘東雲%何賢輝%徐麗慧%施煥敬%高琦%郭賀
왕소영%구양동운%하현휘%서려혜%시환경%고기%곽하
恒河猴%Mamu-B*1703%猴免疫缺陷病毒%四聚体
恆河猴%Mamu-B*1703%猴免疫缺陷病毒%四聚體
항하후%Mamu-B*1703%후면역결함병독%사취체
目的:制备负载SIV抗原肽的中国恒河猴Mamu-B*1703可溶性单体及其四聚体.方法:以含Mama-B*1703重链cDNA序列的pMD19-T克隆为模板,通过PCR的方法克隆Mama-B*1703重链基因,进而构建羧基端融合生物索化酶BirA底物肽(BSP)的Mamu-B*1703重链胞外域融合蛋白的表达载体,并在大肠杆菌中获得表达.β微球蛋白、SIV抗原肽共存时,通过稀释法复性可溶性Mamu-B*1703单体,经生物素化并纯化后与荧光素标记的链亲和素按4:1的比例混合形成四聚体.结果:ELISA检测显示获得具有正确构象的负载SIV抗原肽的Mamu-B-1703四聚体.结论:印度恒河猴Mamu.B}1701特异性抗原肽IW9,与中国恒河猴的Mamu-B*1703相结合形成可溶性Mamu-B*1703/IW9单体和四聚体.
目的:製備負載SIV抗原肽的中國恆河猴Mamu-B*1703可溶性單體及其四聚體.方法:以含Mama-B*1703重鏈cDNA序列的pMD19-T剋隆為模闆,通過PCR的方法剋隆Mama-B*1703重鏈基因,進而構建羧基耑融閤生物索化酶BirA底物肽(BSP)的Mamu-B*1703重鏈胞外域融閤蛋白的錶達載體,併在大腸桿菌中穫得錶達.β微毬蛋白、SIV抗原肽共存時,通過稀釋法複性可溶性Mamu-B*1703單體,經生物素化併純化後與熒光素標記的鏈親和素按4:1的比例混閤形成四聚體.結果:ELISA檢測顯示穫得具有正確構象的負載SIV抗原肽的Mamu-B-1703四聚體.結論:印度恆河猴Mamu.B}1701特異性抗原肽IW9,與中國恆河猴的Mamu-B*1703相結閤形成可溶性Mamu-B*1703/IW9單體和四聚體.
목적:제비부재SIV항원태적중국항하후Mamu-B*1703가용성단체급기사취체.방법:이함Mama-B*1703중련cDNA서렬적pMD19-T극륭위모판,통과PCR적방법극륭Mama-B*1703중련기인,진이구건최기단융합생물색화매BirA저물태(BSP)적Mamu-B*1703중련포외역융합단백적표체재체,병재대장간균중획득표체.β미구단백、SIV항원태공존시,통과희석법복성가용성Mamu-B*1703단체,경생물소화병순화후여형광소표기적련친화소안4:1적비례혼합형성사취체.결과:ELISA검측현시획득구유정학구상적부재SIV항원태적Mamu-B-1703사취체.결론:인도항하후Mamu.B}1701특이성항원태IW9,여중국항하후적Mamu-B*1703상결합형성가용성Mamu-B*1703/IW9단체화사취체.