延安大学学报（医学科学版）
延安大學學報（醫學科學版）
연안대학학보（의학과학판）
JOURNAL OF YANAN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2011年
1期
7-9,14
,共4页
间充质干细胞%心肌细胞%分化%诱导
間充質榦細胞%心肌細胞%分化%誘導
간충질간세포%심기세포%분화%유도
目的 观察在体外5-氮胞苷诱导和体内心肌缺血微环境诱导下,人脐血间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向心肌细胞的定向分化.方法 收集健康产妇脐血细胞,采用密度梯度离心结合差速贴壁的方法分离MSCs,传代培养至第三代,应用流式细胞术分析MSCs 表面分子CD34、CD45、CD44 和CD90的表达.体外应用5-氮胞苷( 5-aza)诱导MSCs四周后,免疫荧光染色和RT-PCR 分别检测MSCs心肌标志物cTnT(肌钙蛋白)和Connexin43(缝隙连接蛋白)的表达;体内将GFP标记的MSCs移植入心肌梗死大鼠模型心肌梗死周边区,移植后1周,取大鼠心脏行冰冻切片,免疫荧光染色检测MSCs心肌特异性蛋白cTnT和Connexin43的表达.结果 分离的MSCs表达表面分子CD44和CD90,不表达CD34和CD45;MSCs体外经5-氮胞苷诱导后在mRNA和蛋白水平均表达心肌标志物cTnT和Connexin43;MSCs体内移植后1周,免疫荧光染色检测发现移植的MSCs表达心肌特异性蛋白cTnT和Connexin43.结论人脐血间充质干细胞可在体外诱导和体内心肌缺血微环境下向心肌细胞分化.
目的 觀察在體外5-氮胞苷誘導和體內心肌缺血微環境誘導下,人臍血間充質榦細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)嚮心肌細胞的定嚮分化.方法 收集健康產婦臍血細胞,採用密度梯度離心結閤差速貼壁的方法分離MSCs,傳代培養至第三代,應用流式細胞術分析MSCs 錶麵分子CD34、CD45、CD44 和CD90的錶達.體外應用5-氮胞苷( 5-aza)誘導MSCs四週後,免疫熒光染色和RT-PCR 分彆檢測MSCs心肌標誌物cTnT(肌鈣蛋白)和Connexin43(縫隙連接蛋白)的錶達;體內將GFP標記的MSCs移植入心肌梗死大鼠模型心肌梗死週邊區,移植後1週,取大鼠心髒行冰凍切片,免疫熒光染色檢測MSCs心肌特異性蛋白cTnT和Connexin43的錶達.結果 分離的MSCs錶達錶麵分子CD44和CD90,不錶達CD34和CD45;MSCs體外經5-氮胞苷誘導後在mRNA和蛋白水平均錶達心肌標誌物cTnT和Connexin43;MSCs體內移植後1週,免疫熒光染色檢測髮現移植的MSCs錶達心肌特異性蛋白cTnT和Connexin43.結論人臍血間充質榦細胞可在體外誘導和體內心肌缺血微環境下嚮心肌細胞分化.
목적 관찰재체외5-담포감유도화체내심기결혈미배경유도하,인제혈간충질간세포(mesenchymal stem cells,MSCs)향심기세포적정향분화.방법 수집건강산부제혈세포,채용밀도제도리심결합차속첩벽적방법분리MSCs,전대배양지제삼대,응용류식세포술분석MSCs 표면분자CD34、CD45、CD44 화CD90적표체.체외응용5-담포감( 5-aza)유도MSCs사주후,면역형광염색화RT-PCR 분별검측MSCs심기표지물cTnT(기개단백)화Connexin43(봉극련접단백)적표체;체내장GFP표기적MSCs이식입심기경사대서모형심기경사주변구,이식후1주,취대서심장행빙동절편,면역형광염색검측MSCs심기특이성단백cTnT화Connexin43적표체.결과 분리적MSCs표체표면분자CD44화CD90,불표체CD34화CD45;MSCs체외경5-담포감유도후재mRNA화단백수평균표체심기표지물cTnT화Connexin43;MSCs체내이식후1주,면역형광염색검측발현이식적MSCs표체심기특이성단백cTnT화Connexin43.결론인제혈간충질간세포가재체외유도화체내심기결혈미배경하향심기세포분화.
