中国法医学杂志
中國法醫學雜誌
중국법의학잡지
CHINESE JOURNAL OF FORENSIC MEDICINE
2011年
3期
173-175,后插2
,共4页
朱典%李彩霞%黄江平%任文彦%万立华%胡兰
硃典%李綵霞%黃江平%任文彥%萬立華%鬍蘭
주전%리채하%황강평%임문언%만립화%호란
法医物证学%龙胆紫染色法%显微捕获联合低体积扩增%口腔上皮细胞
法醫物證學%龍膽紫染色法%顯微捕穫聯閤低體積擴增%口腔上皮細胞
법의물증학%룡담자염색법%현미포획연합저체적확증%구강상피세포
目的 建立用于显微捕获单细胞技术的龙胆紫染色法并评价其应用效果.方法 制作20枚口腔拭子脱落细胞悬液,配制0.05g/mL龙胆紫染液.取100μL口腔细胞悬液加入0.15、0.25、0.5、1.0、2.0μL染色液,考察最佳染色浓度;分别染色5、10、30、60min,考察最佳染色时间;用最佳条件染色后抓捕3个细胞,采用联合LV-PCR技术扩增并进行DNA分型检测,进行重复试验20次,并对同一检材未经染色的抓捕细胞进行检测,用于比对STR分型成功率.将龙胆紫染色法用于案例检材的口腔上皮细胞分离检验.结果 100μL细胞悬液加入0.5μL 0.05g/mL龙胆紫染液,染色5min,胞核呈紫红色,与胞浆对比明显;染色时间延长不影响染色效果及细胞分离检验结果.优化后的龙胆紫染色法对低体积扩增无明显抑制(P>0.05).应用此染色法于案例检材,胞核标识清晰,STR分型结果达同一认定标准.结论 龙胆紫染色法利于细胞核的发现,有助于提高显微捕获单细胞技术的检测效能.
目的 建立用于顯微捕穫單細胞技術的龍膽紫染色法併評價其應用效果.方法 製作20枚口腔拭子脫落細胞懸液,配製0.05g/mL龍膽紫染液.取100μL口腔細胞懸液加入0.15、0.25、0.5、1.0、2.0μL染色液,攷察最佳染色濃度;分彆染色5、10、30、60min,攷察最佳染色時間;用最佳條件染色後抓捕3箇細胞,採用聯閤LV-PCR技術擴增併進行DNA分型檢測,進行重複試驗20次,併對同一檢材未經染色的抓捕細胞進行檢測,用于比對STR分型成功率.將龍膽紫染色法用于案例檢材的口腔上皮細胞分離檢驗.結果 100μL細胞懸液加入0.5μL 0.05g/mL龍膽紫染液,染色5min,胞覈呈紫紅色,與胞漿對比明顯;染色時間延長不影響染色效果及細胞分離檢驗結果.優化後的龍膽紫染色法對低體積擴增無明顯抑製(P>0.05).應用此染色法于案例檢材,胞覈標識清晰,STR分型結果達同一認定標準.結論 龍膽紫染色法利于細胞覈的髮現,有助于提高顯微捕穫單細胞技術的檢測效能.
목적 건립용우현미포획단세포기술적룡담자염색법병평개기응용효과.방법 제작20매구강식자탈락세포현액,배제0.05g/mL룡담자염액.취100μL구강세포현액가입0.15、0.25、0.5、1.0、2.0μL염색액,고찰최가염색농도;분별염색5、10、30、60min,고찰최가염색시간;용최가조건염색후조포3개세포,채용연합LV-PCR기술확증병진행DNA분형검측,진행중복시험20차,병대동일검재미경염색적조포세포진행검측,용우비대STR분형성공솔.장룡담자염색법용우안례검재적구강상피세포분리검험.결과 100μL세포현액가입0.5μL 0.05g/mL룡담자염액,염색5min,포핵정자홍색,여포장대비명현;염색시간연장불영향염색효과급세포분리검험결과.우화후적룡담자염색법대저체적확증무명현억제(P>0.05).응용차염색법우안례검재,포핵표식청석,STR분형결과체동일인정표준.결론 룡담자염색법리우세포핵적발현,유조우제고현미포획단세포기술적검측효능.