复旦学报(医学版)
複旦學報(醫學版)
복단학보(의학판)
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2011年
4期
310-314
,共5页
徐驯宇%黄盛东%方超英%林兴%庄聪文%陈前顺
徐馴宇%黃盛東%方超英%林興%莊聰文%陳前順
서순우%황성동%방초영%림흥%장총문%진전순
食管鳞癌细胞%神经生长因子受体%免疫磁珠分选%肿瘤干细胞
食管鱗癌細胞%神經生長因子受體%免疫磁珠分選%腫瘤榦細胞
식관린암세포%신경생장인자수체%면역자주분선%종류간세포
目的 应用免疫磁珠分选(magnetic activated cell sorting,MACS)法分选人食管鳞癌细胞(esophageal squamous carcinoma cell,ESCC)中的神经生长因子受体(nerve growth factor receptor,NGFR)阳性细胞,并对其肿瘤干细胞样特征进行研究。方法 采用MACS分选人ESCC中的NGFR阳性细胞。通过流式细胞仪法测定分选细胞的纯度及细胞周期分布,并计算细胞回收率;MTT法测定细胞数,绘制生长曲线并计算细胞群体倍增时间;平板克隆实验测定平板克隆形成率;裸鼠接种成瘤实验测定体内致瘤性,从而鉴定NGFR阳性ESCC的干细胞特性。结果 NGFR阳性细胞约占肿瘤细胞的1.89%,经过磁珠分选后纯度显著提高,达89.94%,细胞回收率为19.83%。与未分选细胞相比,分选后NGFR阳性细胞的增殖速度明显提高,生长曲线左移,细胞倍增时间缩短[(25.22±8.15)h vs.(47.41±12.69)h,P=0.01],平板克隆形成率显著增加[(16.27±8.31)% vs.(1.22±0.35)%,P=0.00],处于活跃增殖期S、G2、M期的细胞显著增加(72.7% vs .18.8%);裸鼠皮下接种的转移瘤形成率增加(8/10 vs.1/10),转移瘤重量显著增加[(0.72±0.53)gvs.(0.16±0.26)g,P=0.00]。结论 应用MACS技术能有效分选出人ESCC中的NGFR阳性细胞,其具有肿瘤干细胞特性。
目的 應用免疫磁珠分選(magnetic activated cell sorting,MACS)法分選人食管鱗癌細胞(esophageal squamous carcinoma cell,ESCC)中的神經生長因子受體(nerve growth factor receptor,NGFR)暘性細胞,併對其腫瘤榦細胞樣特徵進行研究。方法 採用MACS分選人ESCC中的NGFR暘性細胞。通過流式細胞儀法測定分選細胞的純度及細胞週期分佈,併計算細胞迴收率;MTT法測定細胞數,繪製生長麯線併計算細胞群體倍增時間;平闆剋隆實驗測定平闆剋隆形成率;裸鼠接種成瘤實驗測定體內緻瘤性,從而鑒定NGFR暘性ESCC的榦細胞特性。結果 NGFR暘性細胞約佔腫瘤細胞的1.89%,經過磁珠分選後純度顯著提高,達89.94%,細胞迴收率為19.83%。與未分選細胞相比,分選後NGFR暘性細胞的增殖速度明顯提高,生長麯線左移,細胞倍增時間縮短[(25.22±8.15)h vs.(47.41±12.69)h,P=0.01],平闆剋隆形成率顯著增加[(16.27±8.31)% vs.(1.22±0.35)%,P=0.00],處于活躍增殖期S、G2、M期的細胞顯著增加(72.7% vs .18.8%);裸鼠皮下接種的轉移瘤形成率增加(8/10 vs.1/10),轉移瘤重量顯著增加[(0.72±0.53)gvs.(0.16±0.26)g,P=0.00]。結論 應用MACS技術能有效分選齣人ESCC中的NGFR暘性細胞,其具有腫瘤榦細胞特性。
목적 응용면역자주분선(magnetic activated cell sorting,MACS)법분선인식관린암세포(esophageal squamous carcinoma cell,ESCC)중적신경생장인자수체(nerve growth factor receptor,NGFR)양성세포,병대기종류간세포양특정진행연구。방법 채용MACS분선인ESCC중적NGFR양성세포。통과류식세포의법측정분선세포적순도급세포주기분포,병계산세포회수솔;MTT법측정세포수,회제생장곡선병계산세포군체배증시간;평판극륭실험측정평판극륭형성솔;라서접충성류실험측정체내치류성,종이감정NGFR양성ESCC적간세포특성。결과 NGFR양성세포약점종류세포적1.89%,경과자주분선후순도현저제고,체89.94%,세포회수솔위19.83%。여미분선세포상비,분선후NGFR양성세포적증식속도명현제고,생장곡선좌이,세포배증시간축단[(25.22±8.15)h vs.(47.41±12.69)h,P=0.01],평판극륭형성솔현저증가[(16.27±8.31)% vs.(1.22±0.35)%,P=0.00],처우활약증식기S、G2、M기적세포현저증가(72.7% vs .18.8%);라서피하접충적전이류형성솔증가(8/10 vs.1/10),전이류중량현저증가[(0.72±0.53)gvs.(0.16±0.26)g,P=0.00]。결론 응용MACS기술능유효분선출인ESCC중적NGFR양성세포,기구유종류간세포특성。