上海第二医科大学学报
上海第二醫科大學學報
상해제이의과대학학보
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINALIS SECONDAE SHANGHAI
2004年
5期
359-361
,共3页
张海宁%侯筱魁%杨冠珍%吴祥甫%吴小燕
張海寧%侯篠魁%楊冠珍%吳祥甫%吳小燕
장해저%후소괴%양관진%오상보%오소연
胰岛素样生长因子I%基因%真核表达载体
胰島素樣生長因子I%基因%真覈錶達載體
이도소양생장인자I%기인%진핵표체재체
目的利用基因工程原理构建人胰岛素样生长因子I(IGF-I)全长基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-IGF-I.方法应用PCR方法从人肝细胞cDNA文库中提取人IGF-I全长cDNA序列,克隆入T载体pMD18中,经测序证实序列正确后,进行双酶切并定向插入真核表达载体pIRES2-EGFP中,利用双酶切、电泳和PCR证实插入片段的正确性.结果经测序证实,目的基因人IGF-I的全长基因序列被正确扩增;构建的真核表达载体经双酶切和PCR鉴定证实,hIGF-I被定向插入到真核表达载体pIRES2-EGFP的多克隆位点中.结论利用基因工程原理可以正确地构建人IGF-I全长基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-IGF-I.
目的利用基因工程原理構建人胰島素樣生長因子I(IGF-I)全長基因的真覈錶達載體pIRES2-EGFP-IGF-I.方法應用PCR方法從人肝細胞cDNA文庫中提取人IGF-I全長cDNA序列,剋隆入T載體pMD18中,經測序證實序列正確後,進行雙酶切併定嚮插入真覈錶達載體pIRES2-EGFP中,利用雙酶切、電泳和PCR證實插入片段的正確性.結果經測序證實,目的基因人IGF-I的全長基因序列被正確擴增;構建的真覈錶達載體經雙酶切和PCR鑒定證實,hIGF-I被定嚮插入到真覈錶達載體pIRES2-EGFP的多剋隆位點中.結論利用基因工程原理可以正確地構建人IGF-I全長基因的真覈錶達載體pIRES2-EGFP-IGF-I.
목적이용기인공정원리구건인이도소양생장인자I(IGF-I)전장기인적진핵표체재체pIRES2-EGFP-IGF-I.방법응용PCR방법종인간세포cDNA문고중제취인IGF-I전장cDNA서렬,극륭입T재체pMD18중,경측서증실서렬정학후,진행쌍매절병정향삽입진핵표체재체pIRES2-EGFP중,이용쌍매절、전영화PCR증실삽입편단적정학성.결과경측서증실,목적기인인IGF-I적전장기인서렬피정학확증;구건적진핵표체재체경쌍매절화PCR감정증실,hIGF-I피정향삽입도진핵표체재체pIRES2-EGFP적다극륭위점중.결론이용기인공정원리가이정학지구건인IGF-I전장기인적진핵표체재체pIRES2-EGFP-IGF-I.
