生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2005年
1期
135-138
,共4页
兔出血症病毒%衣壳蛋白基因%毕赤酵母%表达%病毒样颗粒
兔齣血癥病毒%衣殼蛋白基因%畢赤酵母%錶達%病毒樣顆粒
토출혈증병독%의각단백기인%필적효모%표체%병독양과립
将RHDV VP60基因插入酵母转移载体pPICZ B中转化毕赤酵母菌GS115株,经筛选获得染色体基因组中整合入VP60基因的重组酵母菌.以甲醇诱导培养后经SDS-PAGE和Western blot检测表达产物,在60kD处出现一特异蛋白条带,表明RHDV的衣壳蛋白得到了成功表达.血凝试验表明,表达的重组蛋白具有血凝特性,可以凝集人"O"型红细胞,血凝价达28,同时,该血凝性可被抗RHDV的高免血清所抑制.经电镜观察,重组酵母表达的衣壳蛋白可以在酵母菌体内自聚成大小约40nm,和天然RHDV病毒子在物理形态上类似的病毒样颗粒(VLPs).该病毒样颗粒与兔抗RHDV高免血清作用后可被凝集成团,表明该VLPs与天然RHDV在抗原性上也极为相似.
將RHDV VP60基因插入酵母轉移載體pPICZ B中轉化畢赤酵母菌GS115株,經篩選穫得染色體基因組中整閤入VP60基因的重組酵母菌.以甲醇誘導培養後經SDS-PAGE和Western blot檢測錶達產物,在60kD處齣現一特異蛋白條帶,錶明RHDV的衣殼蛋白得到瞭成功錶達.血凝試驗錶明,錶達的重組蛋白具有血凝特性,可以凝集人"O"型紅細胞,血凝價達28,同時,該血凝性可被抗RHDV的高免血清所抑製.經電鏡觀察,重組酵母錶達的衣殼蛋白可以在酵母菌體內自聚成大小約40nm,和天然RHDV病毒子在物理形態上類似的病毒樣顆粒(VLPs).該病毒樣顆粒與兔抗RHDV高免血清作用後可被凝集成糰,錶明該VLPs與天然RHDV在抗原性上也極為相似.
장RHDV VP60기인삽입효모전이재체pPICZ B중전화필적효모균GS115주,경사선획득염색체기인조중정합입VP60기인적중조효모균.이갑순유도배양후경SDS-PAGE화Western blot검측표체산물,재60kD처출현일특이단백조대,표명RHDV적의각단백득도료성공표체.혈응시험표명,표체적중조단백구유혈응특성,가이응집인"O"형홍세포,혈응개체28,동시,해혈응성가피항RHDV적고면혈청소억제.경전경관찰,중조효모표체적의각단백가이재효모균체내자취성대소약40nm,화천연RHDV병독자재물리형태상유사적병독양과립(VLPs).해병독양과립여토항RHDV고면혈청작용후가피응집성단,표명해VLPs여천연RHDV재항원성상야겁위상사.
