临床输血与检验
臨床輸血與檢驗
림상수혈여검험
JOURNAL OF CLINICAL TRANSFUSION AND LABORATORY MEDICINE
2005年
3期
184-186
,共3页
王家传%蒋作君%沈继龙%汪学龙
王傢傳%蔣作君%瀋繼龍%汪學龍
왕가전%장작군%침계룡%왕학룡
弓形虫%cDNA文库%免疫学筛选%阳性克隆分析
弓形蟲%cDNA文庫%免疫學篩選%暘性剋隆分析
궁형충%cDNA문고%면역학사선%양성극륭분석
目的用弓形虫成囊株感染的小鼠血清筛选弓形虫RH株速殖子cDNA文库,以寻找诊断弓形虫病的抗原基因.方法收集成囊株(Prugniaud 株)慢性感染的小鼠血清,经滤膜吸附法去除大肠杆菌抗体,筛选弓形虫RH株速殖子cDNA文库.对3次复筛得到的阳性克隆进行插入片段的核苷酸序列测定,结果送GenBank进行同源性分析.根据序列测定结果,选取其中1个具有完整开放阅读框架的基因进行分析.结果获得4个持续阳性反应克隆.测序和同源性分析显示,WT1为弓形虫P30基因;WT4为弓形虫N-乙酰磷酸丙糖转移酶基因;WT9与已知的基因无同源性.WT12克隆基因与一未知的弓形虫基因有很高的同源性,且具有1个513 bp大小的完整开放阅读框架,其蛋白质结构和功能预测可能是1个跨膜信号蛋白.结论筛选得到的1个阳性克隆有望成为早期诊断抗原基因,值得进一步研究.
目的用弓形蟲成囊株感染的小鼠血清篩選弓形蟲RH株速殖子cDNA文庫,以尋找診斷弓形蟲病的抗原基因.方法收集成囊株(Prugniaud 株)慢性感染的小鼠血清,經濾膜吸附法去除大腸桿菌抗體,篩選弓形蟲RH株速殖子cDNA文庫.對3次複篩得到的暘性剋隆進行插入片段的覈苷痠序列測定,結果送GenBank進行同源性分析.根據序列測定結果,選取其中1箇具有完整開放閱讀框架的基因進行分析.結果穫得4箇持續暘性反應剋隆.測序和同源性分析顯示,WT1為弓形蟲P30基因;WT4為弓形蟲N-乙酰燐痠丙糖轉移酶基因;WT9與已知的基因無同源性.WT12剋隆基因與一未知的弓形蟲基因有很高的同源性,且具有1箇513 bp大小的完整開放閱讀框架,其蛋白質結構和功能預測可能是1箇跨膜信號蛋白.結論篩選得到的1箇暘性剋隆有望成為早期診斷抗原基因,值得進一步研究.
목적용궁형충성낭주감염적소서혈청사선궁형충RH주속식자cDNA문고,이심조진단궁형충병적항원기인.방법수집성낭주(Prugniaud 주)만성감염적소서혈청,경려막흡부법거제대장간균항체,사선궁형충RH주속식자cDNA문고.대3차복사득도적양성극륭진행삽입편단적핵감산서렬측정,결과송GenBank진행동원성분석.근거서렬측정결과,선취기중1개구유완정개방열독광가적기인진행분석.결과획득4개지속양성반응극륭.측서화동원성분석현시,WT1위궁형충P30기인;WT4위궁형충N-을선린산병당전이매기인;WT9여이지적기인무동원성.WT12극륭기인여일미지적궁형충기인유흔고적동원성,차구유1개513 bp대소적완정개방열독광가,기단백질결구화공능예측가능시1개과막신호단백.결론사선득도적1개양성극륭유망성위조기진단항원기인,치득진일보연구.