林业科学
林業科學
임업과학
SCIENTIA SILVAE SINICAE
2005年
4期
118-122
,共5页
赵同海%徐静%徐红梅%张青文%陈京元
趙同海%徐靜%徐紅梅%張青文%陳京元
조동해%서정%서홍매%장청문%진경원
苏云金芽孢杆菌%杀虫蛋白%松叶面共生菌%工程菌%马尾松毛虫
囌雲金芽孢桿菌%殺蟲蛋白%鬆葉麵共生菌%工程菌%馬尾鬆毛蟲
소운금아포간균%살충단백%송협면공생균%공정균%마미송모충
将来自Bacillus thuringiensis subsp.kurstaki的杀虫基因cryIAc通过综合质粒载体pEG601,整合到松树共生细菌B.cereus(Bc752)的染色体上,得到的工程菌对马尾松毛虫幼虫有明显的杀虫活性.此综合质粒含有能在营养期表达Bt cryIAc基因的强启动子、cryIAc杀虫基因、四环素抗性标记基因tet、8.0 kb的EcoRI-Nco Ⅰ B.cereus (O147)染色体片段.将综合质粒通过电击导入Bc752中,综合质粒与Bc752染色体发生同源重组,将Bt cryIAc基因整合到Bc752的染色体上.通过对转化子的DNA酶切分析、PCR扩增、SDS-PAGE凝胶电泳检测、Western blot、电镜观察、毒力测定,结果表明Bt cryIAc基因已经整合到松树共生细菌Bc752的染色体上,并可高效表达.
將來自Bacillus thuringiensis subsp.kurstaki的殺蟲基因cryIAc通過綜閤質粒載體pEG601,整閤到鬆樹共生細菌B.cereus(Bc752)的染色體上,得到的工程菌對馬尾鬆毛蟲幼蟲有明顯的殺蟲活性.此綜閤質粒含有能在營養期錶達Bt cryIAc基因的彊啟動子、cryIAc殺蟲基因、四環素抗性標記基因tet、8.0 kb的EcoRI-Nco Ⅰ B.cereus (O147)染色體片段.將綜閤質粒通過電擊導入Bc752中,綜閤質粒與Bc752染色體髮生同源重組,將Bt cryIAc基因整閤到Bc752的染色體上.通過對轉化子的DNA酶切分析、PCR擴增、SDS-PAGE凝膠電泳檢測、Western blot、電鏡觀察、毒力測定,結果錶明Bt cryIAc基因已經整閤到鬆樹共生細菌Bc752的染色體上,併可高效錶達.
장래자Bacillus thuringiensis subsp.kurstaki적살충기인cryIAc통과종합질립재체pEG601,정합도송수공생세균B.cereus(Bc752)적염색체상,득도적공정균대마미송모충유충유명현적살충활성.차종합질립함유능재영양기표체Bt cryIAc기인적강계동자、cryIAc살충기인、사배소항성표기기인tet、8.0 kb적EcoRI-Nco Ⅰ B.cereus (O147)염색체편단.장종합질립통과전격도입Bc752중,종합질립여Bc752염색체발생동원중조,장Bt cryIAc기인정합도Bc752적염색체상.통과대전화자적DNA매절분석、PCR확증、SDS-PAGE응효전영검측、Western blot、전경관찰、독력측정,결과표명Bt cryIAc기인이경정합도송수공생세균Bc752적염색체상,병가고효표체.
