细胞生物学杂志
細胞生物學雜誌
세포생물학잡지
CHINESE JOURNAL OF CELL BIOLOGY
2007年
3期
399-404
,共6页
林立%王红%陆再英%汪道文
林立%王紅%陸再英%汪道文
림립%왕홍%륙재영%왕도문
内皮源性超极化因子%EETs%凋亡%内皮细胞%MAPK
內皮源性超極化因子%EETs%凋亡%內皮細胞%MAPK
내피원성초겁화인자%EETs%조망%내피세포%MAPK
花生四烯酸经细胞色素P450表氧化酶代谢产生的内皮来源超极化因子(EDHF)[表氧化二十烷烯酸(EETs)]对内皮细胞具有保护作用.研究了转染细胞色素P450表氧化酶基因CYPBM3·F87V、CYP2C110R及CYP2J2产生内源性EETs,通过检测内皮细胞中Bc1-2表达、caspase-3的活性及MAPK磷酸化水平探讨内源性EDHF的内皮细胞保护效应及其抗TNF-α诱导内皮细胞凋亡的作用机制.原代培养的牛主动脉血管内皮细胞转染CYP450表氧化酶基因24h后,加入TNF-α作用一定时间诱导内皮细胞凋亡,用Western印迹方法检测Bcl-2的表达,MAPK磷酸化水平,同时测定caspase-3的活性.结果显示转染表氧化酶基因能抑制TNF-α诱导的时间依赖性Bcl-2下调,抑制Caspase-3的激活.TNF-α使细胞内磷酸化MAPK水平呈时间依赖性减低,转染表氧化酶基因后细胞内的磷酸化MAPK水平较对照组升高.因此,转染表氧化酶基因CYPBM3·F87V、CYP2C11OR以及CYP2J2使内皮细胞产生内源性EETs(EDHF)通过激活MAPK(ERK1/2)途径,抑制抗凋亡基因Bcl-2的降解,抑制caspase-3的激活,从而抑制TNF-α诱导的内皮细胞凋亡,因而具有内皮保护效应.
花生四烯痠經細胞色素P450錶氧化酶代謝產生的內皮來源超極化因子(EDHF)[錶氧化二十烷烯痠(EETs)]對內皮細胞具有保護作用.研究瞭轉染細胞色素P450錶氧化酶基因CYPBM3·F87V、CYP2C110R及CYP2J2產生內源性EETs,通過檢測內皮細胞中Bc1-2錶達、caspase-3的活性及MAPK燐痠化水平探討內源性EDHF的內皮細胞保護效應及其抗TNF-α誘導內皮細胞凋亡的作用機製.原代培養的牛主動脈血管內皮細胞轉染CYP450錶氧化酶基因24h後,加入TNF-α作用一定時間誘導內皮細胞凋亡,用Western印跡方法檢測Bcl-2的錶達,MAPK燐痠化水平,同時測定caspase-3的活性.結果顯示轉染錶氧化酶基因能抑製TNF-α誘導的時間依賴性Bcl-2下調,抑製Caspase-3的激活.TNF-α使細胞內燐痠化MAPK水平呈時間依賴性減低,轉染錶氧化酶基因後細胞內的燐痠化MAPK水平較對照組升高.因此,轉染錶氧化酶基因CYPBM3·F87V、CYP2C11OR以及CYP2J2使內皮細胞產生內源性EETs(EDHF)通過激活MAPK(ERK1/2)途徑,抑製抗凋亡基因Bcl-2的降解,抑製caspase-3的激活,從而抑製TNF-α誘導的內皮細胞凋亡,因而具有內皮保護效應.
화생사희산경세포색소P450표양화매대사산생적내피래원초겁화인자(EDHF)[표양화이십완희산(EETs)]대내피세포구유보호작용.연구료전염세포색소P450표양화매기인CYPBM3·F87V、CYP2C110R급CYP2J2산생내원성EETs,통과검측내피세포중Bc1-2표체、caspase-3적활성급MAPK린산화수평탐토내원성EDHF적내피세포보호효응급기항TNF-α유도내피세포조망적작용궤제.원대배양적우주동맥혈관내피세포전염CYP450표양화매기인24h후,가입TNF-α작용일정시간유도내피세포조망,용Western인적방법검측Bcl-2적표체,MAPK린산화수평,동시측정caspase-3적활성.결과현시전염표양화매기인능억제TNF-α유도적시간의뢰성Bcl-2하조,억제Caspase-3적격활.TNF-α사세포내린산화MAPK수평정시간의뢰성감저,전염표양화매기인후세포내적린산화MAPK수평교대조조승고.인차,전염표양화매기인CYPBM3·F87V、CYP2C11OR이급CYP2J2사내피세포산생내원성EETs(EDHF)통과격활MAPK(ERK1/2)도경,억제항조망기인Bcl-2적강해,억제caspase-3적격활,종이억제TNF-α유도적내피세포조망,인이구유내피보호효응.
