CAJ | 학술논문

目的: 观察低氧对人单核细胞来源成熟树突状细胞(mDCs)趋化因子受体(CCR7),基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其组织抑制剂(TIMP-1)表达的影响,以期为改进DCs疫苗体内迁移能力低下提供新策略.方法: 分离制备人外周血单核细胞(PBMCs),采用体外常规培养体系 [粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)与白细胞介素-4(IL-4)共同刺激] 诱导DCs,于诱导后第5 d加入TNF-α促成熟,48 h后将mDCs置低氧环境下(1% O2、5% CO2、94% N2)分别继续培养6 h、12 h,设常氧对照组(21% O2、5% CO2),收获细胞及培养上清;采用RT-PCR技术检测MMP-9、TIMP-1及CCR7的表达;明胶酶谱法检测培养上清中MMP-9的水平与活性,流式细胞术检测mDCs表面CCR7的表达.结果: RT-PCR及酶谱实验结果显示,低氧6 h、12 h处理组mDCs MMP-9水平显著下降;与对照组比较,各低氧处理组mDCs均未检测到TIMP-1 mRNA表达的变化;转录及细胞表面表达分析结果显示,与常氧对照组比较,低氧6 h处理组趋化因子受体CCR7表达显著降低,而12 h处理组其表达显著回升至近常氧组水平.结论: 低氧下调mDCs MMP-9表达,破坏MMP-9/TIMP-1平衡,可能是DCs疫苗体内迁移能力低下的主要因素之一.趋化因子受体CCR7在mDCs对低氧应答中可能起重要作用.
목적: 관찰저양대인단핵세포래원성숙수돌상세포(mDCs)추화인자수체(CCR7),기질금속단백매-9(MMP-9)급기조직억제제(TIMP-1)표체적영향,이기위개진DCs역묘체내천이능력저하제공신책략.방법: 분리제비인외주혈단핵세포(PBMCs),채용체외상규배양체계 [립-거서세포집락자격인자(GM-CSF)여백세포개소-4(IL-4)공동자격] 유도DCs,우유도후제5 d가입TNF-α촉성숙,48 h후장mDCs치저양배경하(1% O2、5% CO2、94% N2)분별계속배양6 h、12 h,설상양대조조(21% O2、5% CO2),수획세포급배양상청;채용RT-PCR기술검측MMP-9、TIMP-1급CCR7적표체;명효매보법검측배양상청중MMP-9적수평여활성,류식세포술검측mDCs표면CCR7적표체.결과: RT-PCR급매보실험결과현시,저양6 h、12 h처리조mDCs MMP-9수평현저하강;여대조조비교,각저양처리조mDCs균미검측도TIMP-1 mRNA표체적변화;전록급세포표면표체분석결과현시,여상양대조조비교,저양6 h처리조추화인자수체CCR7표체현저강저,이12 h처리조기표체현저회승지근상양조수평.결론: 저양하조mDCs MMP-9표체,파배MMP-9/TIMP-1평형,가능시DCs역묘체내천이능력저하적주요인소지일.추화인자수체CCR7재mDCs대저양응답중가능기중요작용.