中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2009年
10期
1969-1974
,共6页
张晓宇%徐永健%刘先胜%张珍祥%倪望%陈仕新
張曉宇%徐永健%劉先勝%張珍祥%倪望%陳仕新
장효우%서영건%류선성%장진상%예망%진사신
香烟提取物%哮喘%气道平滑肌细胞%细胞周期蛋白D1
香煙提取物%哮喘%氣道平滑肌細胞%細胞週期蛋白D1
향연제취물%효천%기도평활기세포%세포주기단백D1
目的: 探讨香烟提取物(CSE)对支气管哮喘(简称哮喘)大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖作用及可能机制.方法: 16只SD大鼠随机分为对照组和哮喘组,各8只.原代培养大鼠ASMCs,取第3-6代细胞,分为对照组、对照+CSE组、哮喘组、哮喘+CSE组、哮喘+CSE+嘧啶基-苯磺酰胺(GW8510,细胞周期蛋白依赖激酶-4抑制剂)组、哮喘+GW8510组.用流式细胞术、四甲基偶氮唑盐(MTT)法及增殖细胞核抗原(PCNA)免疫细胞化学技术检测ASMCs增殖;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹(Western blotting)检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达.结果: (1)哮喘组ASMCs与对照组ASMCs相比,在S+G2/M期比例、吸光度(A)值和PCNA表达率上明显增高,差异显著(P<0.01).(2)哮喘组ASMCs S+G2/M期比例、吸光度(A)值和PCNA表达率分别为(18.30±1.12)%、0.512±0.110、(55.1±3.7)%;哮喘+CSE组分别为(32.12±1.17)%、0.801±0.210、(90.2±7.3)%;哮喘+CSE+GW8510组分别为(17.21±0.95)%、0.508±0.009、(54.3±4.8)%;哮喘+GW8510组分别为(11.16±1.48)%、0.345±0.078、(40.6±5.4)%.除哮喘组、哮喘+CSE+GW8510组两组比较差异无显著外,其余两两比较差异均显著(P<0.01).(3)哮喘组、哮喘+CSE组、哮喘+CSE+GW8510组、哮喘+GW8510组ASMCs cyclin D1 mRNA A值比值和蛋白表达A值比值分别为0.236±0.045、0.271±0.002;0.369±0.124、0.379±0.002;0.231±0.075、0.261±0.002;0.165±0.064、0.193±0.002.除哮喘组、哮喘+CSE+GW8510组两组比较差异无显著外,其余两两比较差异均显著(P<0.01).结论: 正常与哮喘大鼠ASMCs在CSE干预后增殖明显加快,cyclin D1表达明显增加.CSE可能是通过cyclin D1参与调控哮喘大鼠ASMCs的增殖.
目的: 探討香煙提取物(CSE)對支氣管哮喘(簡稱哮喘)大鼠氣道平滑肌細胞(ASMCs)增殖作用及可能機製.方法: 16隻SD大鼠隨機分為對照組和哮喘組,各8隻.原代培養大鼠ASMCs,取第3-6代細胞,分為對照組、對照+CSE組、哮喘組、哮喘+CSE組、哮喘+CSE+嘧啶基-苯磺酰胺(GW8510,細胞週期蛋白依賴激酶-4抑製劑)組、哮喘+GW8510組.用流式細胞術、四甲基偶氮唑鹽(MTT)法及增殖細胞覈抗原(PCNA)免疫細胞化學技術檢測ASMCs增殖;用逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)和蛋白質印跡(Western blotting)檢測細胞週期蛋白D1(cyclin D1)的錶達.結果: (1)哮喘組ASMCs與對照組ASMCs相比,在S+G2/M期比例、吸光度(A)值和PCNA錶達率上明顯增高,差異顯著(P<0.01).(2)哮喘組ASMCs S+G2/M期比例、吸光度(A)值和PCNA錶達率分彆為(18.30±1.12)%、0.512±0.110、(55.1±3.7)%;哮喘+CSE組分彆為(32.12±1.17)%、0.801±0.210、(90.2±7.3)%;哮喘+CSE+GW8510組分彆為(17.21±0.95)%、0.508±0.009、(54.3±4.8)%;哮喘+GW8510組分彆為(11.16±1.48)%、0.345±0.078、(40.6±5.4)%.除哮喘組、哮喘+CSE+GW8510組兩組比較差異無顯著外,其餘兩兩比較差異均顯著(P<0.01).(3)哮喘組、哮喘+CSE組、哮喘+CSE+GW8510組、哮喘+GW8510組ASMCs cyclin D1 mRNA A值比值和蛋白錶達A值比值分彆為0.236±0.045、0.271±0.002;0.369±0.124、0.379±0.002;0.231±0.075、0.261±0.002;0.165±0.064、0.193±0.002.除哮喘組、哮喘+CSE+GW8510組兩組比較差異無顯著外,其餘兩兩比較差異均顯著(P<0.01).結論: 正常與哮喘大鼠ASMCs在CSE榦預後增殖明顯加快,cyclin D1錶達明顯增加.CSE可能是通過cyclin D1參與調控哮喘大鼠ASMCs的增殖.
목적: 탐토향연제취물(CSE)대지기관효천(간칭효천)대서기도평활기세포(ASMCs)증식작용급가능궤제.방법: 16지SD대서수궤분위대조조화효천조,각8지.원대배양대서ASMCs,취제3-6대세포,분위대조조、대조+CSE조、효천조、효천+CSE조、효천+CSE+밀정기-분광선알(GW8510,세포주기단백의뢰격매-4억제제)조、효천+GW8510조.용류식세포술、사갑기우담서염(MTT)법급증식세포핵항원(PCNA)면역세포화학기술검측ASMCs증식;용역전록-취합매련반응(RT-PCR)화단백질인적(Western blotting)검측세포주기단백D1(cyclin D1)적표체.결과: (1)효천조ASMCs여대조조ASMCs상비,재S+G2/M기비례、흡광도(A)치화PCNA표체솔상명현증고,차이현저(P<0.01).(2)효천조ASMCs S+G2/M기비례、흡광도(A)치화PCNA표체솔분별위(18.30±1.12)%、0.512±0.110、(55.1±3.7)%;효천+CSE조분별위(32.12±1.17)%、0.801±0.210、(90.2±7.3)%;효천+CSE+GW8510조분별위(17.21±0.95)%、0.508±0.009、(54.3±4.8)%;효천+GW8510조분별위(11.16±1.48)%、0.345±0.078、(40.6±5.4)%.제효천조、효천+CSE+GW8510조량조비교차이무현저외,기여량량비교차이균현저(P<0.01).(3)효천조、효천+CSE조、효천+CSE+GW8510조、효천+GW8510조ASMCs cyclin D1 mRNA A치비치화단백표체A치비치분별위0.236±0.045、0.271±0.002;0.369±0.124、0.379±0.002;0.231±0.075、0.261±0.002;0.165±0.064、0.193±0.002.제효천조、효천+CSE+GW8510조량조비교차이무현저외,기여량량비교차이균현저(P<0.01).결론: 정상여효천대서ASMCs재CSE간예후증식명현가쾌,cyclin D1표체명현증가.CSE가능시통과cyclin D1삼여조공효천대서ASMCs적증식.