人巨细胞病毒感染及其IE86蛋白对ARPE-19细胞周期的影响
인거세포병독감염급기IE86단백대ARPE-19세포주기적영향
Effects of human cytomegalovirus infection and IE86 on the cell cycles of ARPE-19
  • 万方数据
    医学研究生学报 의학연구생학보
    JOURNAL OF MEDICAL POSTGRADUATE
    2010年 5期 452-455 ,共4页

    刘海燕%王斌%李玲%白志强%姜光域%王海涛%钱冬萌%赵巍%闫志勇%丁守怡%宋旭霞

    류해연%왕빈%리령%백지강%강광역%왕해도%전동맹%조외%염지용%정수이%송욱하

    人巨细胞病毒%ARPE-19%IE2基因%细胞周期 人巨細胞病毒%ARPE-19%IE2基因%細胞週期
    인거세포병독%ARPE-19%IE2기인%세포주기
    目的 研究人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染ARPE-19细胞后对其细胞周期的影响,观察这种变化与HCMV IE2基因的关系,探讨HCMV感染的发病机制. 方法 用HCMV感染同步化的ARPE-19作为感染组,同时设模拟感染组为对照组.于感染后第1、2、3、4、5天收获细胞,RT-PCR方法 检测HCMV IE mRNA的表达水平,用免疫荧光法检测细胞核内HCMV IE蛋白的表达,Western blot法检测HCMV早期蛋白IE和晚期蛋白pp65的表达.采用PCR方法 从质粒pIEP86AD169扩增出IE2片段,构建真核表达质粒pEGFP-N3-IE2,脂质体介导瞬时转染ARPE-19细胞,RT-PCR、免疫荧光法分析IE2基因的表达.流式细胞术检测细胞周期的变化. 结果 HCMV IE72、IE86和pp65可分别在病毒感染ARPE-19细胞后第2、3和5天时检测到表达,流式细胞术示感染组在感染第3、4、5天细胞周期的S期细胞比例显著增高,与对照组比较差异均有显著性统计学意义,P﹤0.05.瞬时转染质粒pEGFP-N3-IE2后细胞周期表现为S期细胞比例显著增高. 结论 ARPE-19是HCMV的允许细胞,HCMV可引起ARPE-19细胞周期的改变,这种变化与IE2基因的表达有一定的关系.
    목적 연구인거세포병독(human cytomegalovirus,HCMV)감염ARPE-19세포후대기세포주기적영향,관찰저충변화여HCMV IE2기인적관계,탐토HCMV감염적발병궤제. 방법 용HCMV감염동보화적ARPE-19작위감염조,동시설모의감염조위대조조.우감염후제1、2、3、4、5천수획세포,RT-PCR방법 검측HCMV IE mRNA적표체수평,용면역형광법검측세포핵내HCMV IE단백적표체,Western blot법검측HCMV조기단백IE화만기단백pp65적표체.채용PCR방법 종질립pIEP86AD169확증출IE2편단,구건진핵표체질립pEGFP-N3-IE2,지질체개도순시전염ARPE-19세포,RT-PCR、면역형광법분석IE2기인적표체.류식세포술검측세포주기적변화. 결과 HCMV IE72、IE86화pp65가분별재병독감염ARPE-19세포후제2、3화5천시검측도표체,류식세포술시감염조재감염제3、4、5천세포주기적S기세포비례현저증고,여대조조비교차이균유현저성통계학의의,P﹤0.05.순시전염질립pEGFP-N3-IE2후세포주기표현위S기세포비례현저증고. 결론 ARPE-19시HCMV적윤허세포,HCMV가인기ARPE-19세포주기적개변,저충변화여IE2기인적표체유일정적관계.
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