CAJ | 학술논문

目的:研究共刺激分子CD137L重组质粒对HBsAg DNA疫苗诱导小鼠细胞免疫应答和回忆反应的佐剂作用.方法:将小鼠CD137L真核表达载体(pcD137L)体外转染NIH3T3细胞,RT-PCR、流式细胞仪和免疫荧光法分别检测CD137L mRNA和蛋白的表达;pcD137L与HBsAg DNA疫苗(pcDS)通过肌肉注射联合免疫BALB/c小鼠,LDH释放法测定体外脾细胞特异性CTL杀伤活性;流式细胞仪分析小鼠脾脏CD8+记忆T细胞数量;流式细胞仪检测CD8+T细胞及淋巴细胞中IFN-γ和IL-4的表达水平.结果:重组质粒pcD137L在NIH3T3细胞中获得有效表达.与pcDS单独免疫组比较:免疫后1周,pcDS+pcD137L免疫组能诱导更强的HBsAg特异性CTL杀伤活性(P<0.05);免疫后1周和12周,pcDS+pcD137L免疫组CD8+T细胞CD44high和CD127表达水平均显著增高(P<0.05或P<0.01);免疫后1周、12周和13周(即再次给予pcDS刺激后1周),pcDS+pcD137L免疫组分别明显上调CD8+T细胞和淋巴细胞中IFN-γ产生细胞的百分比,差异有显著意义(均P<0.05).结论:共刺激分子CD137L能显著增强HBsAg DNA疫苗诱导的Tc1(I型)细胞免疫、特异性CTL应答及回忆反应,是诱导HBV特异性T细胞应答的有效佐剂.
목적:연구공자격분자CD137L중조질립대HBsAg DNA역묘유도소서세포면역응답화회억반응적좌제작용.방법:장소서CD137L진핵표체재체(pcD137L)체외전염NIH3T3세포,RT-PCR、류식세포의화면역형광법분별검측CD137L mRNA화단백적표체;pcD137L여HBsAg DNA역묘(pcDS)통과기육주사연합면역BALB/c소서,LDH석방법측정체외비세포특이성CTL살상활성;류식세포의분석소서비장CD8+기억T세포수량;류식세포의검측CD8+T세포급림파세포중IFN-γ화IL-4적표체수평.결과:중조질립pcD137L재NIH3T3세포중획득유효표체.여pcDS단독면역조비교:면역후1주,pcDS+pcD137L면역조능유도경강적HBsAg특이성CTL살상활성(P<0.05);면역후1주화12주,pcDS+pcD137L면역조CD8+T세포CD44high화CD127표체수평균현저증고(P<0.05혹P<0.01);면역후1주、12주화13주(즉재차급여pcDS자격후1주),pcDS+pcD137L면역조분별명현상조CD8+T세포화림파세포중IFN-γ산생세포적백분비,차이유현저의의(균P<0.05).결론:공자격분자CD137L능현저증강HBsAg DNA역묘유도적Tc1(I형)세포면역、특이성CTL응답급회억반응,시유도HBV특이성T세포응답적유효좌제.