临床荟萃
臨床薈萃
림상회췌
CLINICAL FOCUS
2010年
24期
2129-2131,封3
,共4页
郭晓华%颉玉欣%张牧霞%赵驻军
郭曉華%頡玉訢%張牧霞%趙駐軍
곽효화%힐옥흔%장목하%조주군
间充质干细胞%成骨细胞%血管内皮生长因子%基因转染
間充質榦細胞%成骨細胞%血管內皮生長因子%基因轉染
간충질간세포%성골세포%혈관내피생장인자%기인전염
目的 大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)在药物诱导下定向分化为成骨细胞,对其进行血管内皮生长因子(VEGF)基因片段转染,观察其生物学特性的变化.方法 选择MSCs体外培养的第2代细胞诱导其向成骨细胞分化,实验分为对照组和地塞米松浓度1×10-8mol/L诱导组.对诱导分化后的成骨细胞进行碱性磷酸酶(ALP)染色和活性测定及Ⅰ型胶原的免疫组化染色、茜素红钙节结染色的鉴定.对诱导后的成骨细胞进行已构建的VEGF基因片段(ad5-h-VEGF)的人5型腺病毒载体进行转染,并进行免疫组化鉴定.结果 诱导培养第3、6、9、12天的ALP活性(A405)测定,地塞米松浓度1×10-8mol/L组测定值(A值)分别为0.1 44±0.004、0.175±0.003、0.207±0.010、0.224±0.004;对照组分别为0.101±0.003、0.124±0.016、0.133±0.005、0.139±0.005.两组在组间、不同时点以及组间和不同时点的交互作用差异均有统计学意义(P＜0.05).MSCs经地塞米松的成骨诱导剂诱导7～9天可出现碱性磷酸酶染色阳性,连续培养20天后可出现茜素红钙节结染色阳性.转染后细胞VEGF免疫组化染色阳性.结论 对骨髓间充质干细胞来源的成骨细胞作ad5-h-VEGF基因转染,可使诱导的成骨细胞胞浆中VEGF阳性表达.
目的 大鼠骨髓間充質榦細胞(MSCs)在藥物誘導下定嚮分化為成骨細胞,對其進行血管內皮生長因子(VEGF)基因片段轉染,觀察其生物學特性的變化.方法 選擇MSCs體外培養的第2代細胞誘導其嚮成骨細胞分化,實驗分為對照組和地塞米鬆濃度1×10-8mol/L誘導組.對誘導分化後的成骨細胞進行堿性燐痠酶(ALP)染色和活性測定及Ⅰ型膠原的免疫組化染色、茜素紅鈣節結染色的鑒定.對誘導後的成骨細胞進行已構建的VEGF基因片段(ad5-h-VEGF)的人5型腺病毒載體進行轉染,併進行免疫組化鑒定.結果 誘導培養第3、6、9、12天的ALP活性(A405)測定,地塞米鬆濃度1×10-8mol/L組測定值(A值)分彆為0.1 44±0.004、0.175±0.003、0.207±0.010、0.224±0.004;對照組分彆為0.101±0.003、0.124±0.016、0.133±0.005、0.139±0.005.兩組在組間、不同時點以及組間和不同時點的交互作用差異均有統計學意義(P＜0.05).MSCs經地塞米鬆的成骨誘導劑誘導7～9天可齣現堿性燐痠酶染色暘性,連續培養20天後可齣現茜素紅鈣節結染色暘性.轉染後細胞VEGF免疫組化染色暘性.結論 對骨髓間充質榦細胞來源的成骨細胞作ad5-h-VEGF基因轉染,可使誘導的成骨細胞胞漿中VEGF暘性錶達.
목적 대서골수간충질간세포(MSCs)재약물유도하정향분화위성골세포,대기진행혈관내피생장인자(VEGF)기인편단전염,관찰기생물학특성적변화.방법 선택MSCs체외배양적제2대세포유도기향성골세포분화,실험분위대조조화지새미송농도1×10-8mol/L유도조.대유도분화후적성골세포진행감성린산매(ALP)염색화활성측정급Ⅰ형효원적면역조화염색、천소홍개절결염색적감정.대유도후적성골세포진행이구건적VEGF기인편단(ad5-h-VEGF)적인5형선병독재체진행전염,병진행면역조화감정.결과 유도배양제3、6、9、12천적ALP활성(A405)측정,지새미송농도1×10-8mol/L조측정치(A치)분별위0.1 44±0.004、0.175±0.003、0.207±0.010、0.224±0.004;대조조분별위0.101±0.003、0.124±0.016、0.133±0.005、0.139±0.005.량조재조간、불동시점이급조간화불동시점적교호작용차이균유통계학의의(P＜0.05).MSCs경지새미송적성골유도제유도7～9천가출현감성린산매염색양성,련속배양20천후가출현천소홍개절결염색양성.전염후세포VEGF면역조화염색양성.결론 대골수간충질간세포래원적성골세포작ad5-h-VEGF기인전염,가사유도적성골세포포장중VEGF양성표체.
