农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2012年
6期
695-702
,共8页
刘琼%龚雨恒%王国镔%文心田%黄小波%曹三杰%San-Jie
劉瓊%龔雨恆%王國鑌%文心田%黃小波%曹三傑%San-Jie
류경%공우항%왕국빈%문심전%황소파%조삼걸%San-Jie
胸膜肺炎放线杆菌(APP)%毒素IC基因(apxIC)%副猪嗜血杆菌(Hps)%外膜蛋白P2基因(ompP2)%复合突变株
胸膜肺炎放線桿菌(APP)%毒素IC基因(apxIC)%副豬嗜血桿菌(Hps)%外膜蛋白P2基因(ompP2)%複閤突變株
흉막폐염방선간균(APP)%독소IC기인(apxIC)%부저기혈간균(Hps)%외막단백P2기인(ompP2)%복합돌변주
猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)以及副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)是引起猪发病的2种病菌.本研究以APP血清5型分离株(SW1)为基础材料,通过构建重组转移载体pBOSK△IC-1和pBOSK△IC/ompP2,构成卡那霉素抗性基因(Kanr)和枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)的果聚蔗糖酶基因(sacB)的正负双向筛选表达盒,并筛选获得SW1株缺失毒素Ⅰ的激活基因C(Apx(I)C),同时嵌合Hps外膜蛋白P2基因(ompP2)的复合突变株SW1 △ApxIC/ompP2.该突变株经鉴定,与SW1亲本株相比,其缺失了大小为475 bp的apxIC基因,同时嵌合有大小为1 107bp的Hps ompP2基因,其基本生长特性与亲本株(SW1)没有显著区别;同时在体外,连续传代10代之后缺失的apxIC基因不会发生回复突变,嵌入的ompP2基因仍能够稳定遗传.本研究成功构建了猪传染性胸膜肺炎放线杆菌缺失apxIC基因并嵌合有Hps ompP2基因复合突变株,为今后研究APP和Hps新型二联疫苗打下基础.
豬胸膜肺炎放線桿菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)以及副豬嗜血桿菌(Haemophilus parasuis,Hps)是引起豬髮病的2種病菌.本研究以APP血清5型分離株(SW1)為基礎材料,通過構建重組轉移載體pBOSK△IC-1和pBOSK△IC/ompP2,構成卡那黴素抗性基因(Kanr)和枯草芽胞桿菌(Bacillus subtilis)的果聚蔗糖酶基因(sacB)的正負雙嚮篩選錶達盒,併篩選穫得SW1株缺失毒素Ⅰ的激活基因C(Apx(I)C),同時嵌閤Hps外膜蛋白P2基因(ompP2)的複閤突變株SW1 △ApxIC/ompP2.該突變株經鑒定,與SW1親本株相比,其缺失瞭大小為475 bp的apxIC基因,同時嵌閤有大小為1 107bp的Hps ompP2基因,其基本生長特性與親本株(SW1)沒有顯著區彆;同時在體外,連續傳代10代之後缺失的apxIC基因不會髮生迴複突變,嵌入的ompP2基因仍能夠穩定遺傳.本研究成功構建瞭豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌缺失apxIC基因併嵌閤有Hps ompP2基因複閤突變株,為今後研究APP和Hps新型二聯疫苗打下基礎.
저흉막폐염방선간균(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)이급부저기혈간균(Haemophilus parasuis,Hps)시인기저발병적2충병균.본연구이APP혈청5형분리주(SW1)위기출재료,통과구건중조전이재체pBOSK△IC-1화pBOSK△IC/ompP2,구성잡나매소항성기인(Kanr)화고초아포간균(Bacillus subtilis)적과취자당매기인(sacB)적정부쌍향사선표체합,병사선획득SW1주결실독소Ⅰ적격활기인C(Apx(I)C),동시감합Hps외막단백P2기인(ompP2)적복합돌변주SW1 △ApxIC/ompP2.해돌변주경감정,여SW1친본주상비,기결실료대소위475 bp적apxIC기인,동시감합유대소위1 107bp적Hps ompP2기인,기기본생장특성여친본주(SW1)몰유현저구별;동시재체외,련속전대10대지후결실적apxIC기인불회발생회복돌변,감입적ompP2기인잉능구은정유전.본연구성공구건료저전염성흉막폐염방선간균결실apxIC기인병감합유Hps ompP2기인복합돌변주,위금후연구APP화Hps신형이련역묘타하기출.
