科学通报
科學通報
과학통보
CHINESE SCIENCE BULLETIN
2003年
24期
2539-2543
,共5页
ATP合酶%ε亚基%缺失突变%叶绿体
ATP閤酶%ε亞基%缺失突變%葉綠體
ATP합매%ε아기%결실돌변%협록체
在E.coli中表达菠菜叶绿体ATP合酶ε亚基及其N端或C端部分氨基酸残基缺失突变体的蛋白.经初步纯化,测定将它们加入到叶绿体悬浮液中后对叶绿体的毫秒延迟发光快相强度及其循环和非循环光合磷酸化活力的影响,以及它们与缺失ε亚基的类囊体膜重组后的ATP合成活力.结果显示,外加ε亚基或缺失突变的ε亚基蛋白于叶绿体悬浮液中对叶绿体的毫秒延迟发光快相强度和光合磷酸化活力均有促进作用.N端缺失突变的ε亚基随着其缺失氨基酸残基数目的增加(从1→5个),对叶绿体的毫秒延迟发光快相强度和光合磷酸化活力的促进作用逐渐减弱,且与缺失ε亚基的类囊体膜重组后的ATP合成活力也逐渐减小;但是C端缺失突变的ε亚基随着其缺失氨基酸残基数目的增加(从6→10个),其促进作用反而逐渐增强,且与缺失ε亚基的类囊体膜重组后的ATP合成活力也逐渐增大,但均仍不如野生型ε亚基的高.这些结果表明,叶绿体ATP合酶ε亚基的N端结构可通过调节ε亚基的堵塞跨膜质子泄漏能力影响合酶的ATP合成能力,叶绿体ATP合酶ε亚基C端区域对于ATP的合成具有微妙的调节作用.
在E.coli中錶達菠菜葉綠體ATP閤酶ε亞基及其N耑或C耑部分氨基痠殘基缺失突變體的蛋白.經初步純化,測定將它們加入到葉綠體懸浮液中後對葉綠體的毫秒延遲髮光快相彊度及其循環和非循環光閤燐痠化活力的影響,以及它們與缺失ε亞基的類囊體膜重組後的ATP閤成活力.結果顯示,外加ε亞基或缺失突變的ε亞基蛋白于葉綠體懸浮液中對葉綠體的毫秒延遲髮光快相彊度和光閤燐痠化活力均有促進作用.N耑缺失突變的ε亞基隨著其缺失氨基痠殘基數目的增加(從1→5箇),對葉綠體的毫秒延遲髮光快相彊度和光閤燐痠化活力的促進作用逐漸減弱,且與缺失ε亞基的類囊體膜重組後的ATP閤成活力也逐漸減小;但是C耑缺失突變的ε亞基隨著其缺失氨基痠殘基數目的增加(從6→10箇),其促進作用反而逐漸增彊,且與缺失ε亞基的類囊體膜重組後的ATP閤成活力也逐漸增大,但均仍不如野生型ε亞基的高.這些結果錶明,葉綠體ATP閤酶ε亞基的N耑結構可通過調節ε亞基的堵塞跨膜質子洩漏能力影響閤酶的ATP閤成能力,葉綠體ATP閤酶ε亞基C耑區域對于ATP的閤成具有微妙的調節作用.
재E.coli중표체파채협록체ATP합매ε아기급기N단혹C단부분안기산잔기결실돌변체적단백.경초보순화,측정장타문가입도협록체현부액중후대협록체적호초연지발광쾌상강도급기순배화비순배광합린산화활력적영향,이급타문여결실ε아기적류낭체막중조후적ATP합성활력.결과현시,외가ε아기혹결실돌변적ε아기단백우협록체현부액중대협록체적호초연지발광쾌상강도화광합린산화활력균유촉진작용.N단결실돌변적ε아기수착기결실안기산잔기수목적증가(종1→5개),대협록체적호초연지발광쾌상강도화광합린산화활력적촉진작용축점감약,차여결실ε아기적류낭체막중조후적ATP합성활력야축점감소;단시C단결실돌변적ε아기수착기결실안기산잔기수목적증가(종6→10개),기촉진작용반이축점증강,차여결실ε아기적류낭체막중조후적ATP합성활력야축점증대,단균잉불여야생형ε아기적고.저사결과표명,협록체ATP합매ε아기적N단결구가통과조절ε아기적도새과막질자설루능력영향합매적ATP합성능력,협록체ATP합매ε아기C단구역대우ATP적합성구유미묘적조절작용.
