中国医学科学院学报
中國醫學科學院學報
중국의학과학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE SINICAE
2005年
1期
67-72
,共6页
刘晓娟%朱明昭%宋国兴%许于飞%刘宏伟%王盛%杨宝玲%董方田%许雪梅
劉曉娟%硃明昭%宋國興%許于飛%劉宏偉%王盛%楊寶玲%董方田%許雪梅
류효연%주명소%송국흥%허우비%류굉위%왕성%양보령%동방전%허설매
DNA疫苗%白介素2%单纯疱疹病毒1型%角膜炎
DNA疫苗%白介素2%單純皰疹病毒1型%角膜炎
DNA역묘%백개소2%단순포진병독1형%각막염
目的研究白介素2(IL-2)cDNA协同单纯疱疹病毒1型(HSV-1)gD核酸疫苗免疫对机体体液免疫和细胞免疫应答的影响,以及在HSV-1病毒角膜攻击时的保护效果.方法利用pcDNA3.1载体分别构建HSV-1糖蛋白D和IL-2的真核表达质粒pgD和pIL-2,体外鉴定其表达.动物实验分为pcDNA3.1空载体对照组、pgD单独免疫组和pgD+pIL-2联合免疫组3组,具体为通过肌肉免疫接种BALB/c小鼠3次,间隔2周,每次接种质粒100μg,第3次免疫后2周,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体滴度并做亚型分析,利用3H-TdR掺人法进行Th细胞增殖实验,ELISA试剂盒检测Th细胞分泌的IL-2、IFN-γ和IL-10水平,耳廓肿胀实验检测迟发型超敏反应(DTH)反应;HSV-1病毒角膜攻击后,裂隙灯显微镜观察角膜上皮病变.结果与pgD单独免疫组相比,pIL-2的协同免疫可以显著提高IgG2a抗体滴度、Th细胞增殖反应和DTH反应,Th细胞分泌IL-2和IFN-γ水平也显著提高,IL-10水平明显下降.在动物保护实验中,pIL-2的协同免疫明显增强了pgD疫苗在病毒攻击时对角膜的保护效果.结论IL-2 cDNA的协同免疫可以显著提高pgD核酸疫苗诱导的体液免疫和细胞免疫应答水平,增加核酸疫苗的免疫保护效果.
目的研究白介素2(IL-2)cDNA協同單純皰疹病毒1型(HSV-1)gD覈痠疫苗免疫對機體體液免疫和細胞免疫應答的影響,以及在HSV-1病毒角膜攻擊時的保護效果.方法利用pcDNA3.1載體分彆構建HSV-1糖蛋白D和IL-2的真覈錶達質粒pgD和pIL-2,體外鑒定其錶達.動物實驗分為pcDNA3.1空載體對照組、pgD單獨免疫組和pgD+pIL-2聯閤免疫組3組,具體為通過肌肉免疫接種BALB/c小鼠3次,間隔2週,每次接種質粒100μg,第3次免疫後2週,用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測抗體滴度併做亞型分析,利用3H-TdR摻人法進行Th細胞增殖實驗,ELISA試劑盒檢測Th細胞分泌的IL-2、IFN-γ和IL-10水平,耳廓腫脹實驗檢測遲髮型超敏反應(DTH)反應;HSV-1病毒角膜攻擊後,裂隙燈顯微鏡觀察角膜上皮病變.結果與pgD單獨免疫組相比,pIL-2的協同免疫可以顯著提高IgG2a抗體滴度、Th細胞增殖反應和DTH反應,Th細胞分泌IL-2和IFN-γ水平也顯著提高,IL-10水平明顯下降.在動物保護實驗中,pIL-2的協同免疫明顯增彊瞭pgD疫苗在病毒攻擊時對角膜的保護效果.結論IL-2 cDNA的協同免疫可以顯著提高pgD覈痠疫苗誘導的體液免疫和細胞免疫應答水平,增加覈痠疫苗的免疫保護效果.
목적연구백개소2(IL-2)cDNA협동단순포진병독1형(HSV-1)gD핵산역묘면역대궤체체액면역화세포면역응답적영향,이급재HSV-1병독각막공격시적보호효과.방법이용pcDNA3.1재체분별구건HSV-1당단백D화IL-2적진핵표체질립pgD화pIL-2,체외감정기표체.동물실험분위pcDNA3.1공재체대조조、pgD단독면역조화pgD+pIL-2연합면역조3조,구체위통과기육면역접충BALB/c소서3차,간격2주,매차접충질립100μg,제3차면역후2주,용매련면역흡부시험(ELISA)검측항체적도병주아형분석,이용3H-TdR참인법진행Th세포증식실험,ELISA시제합검측Th세포분비적IL-2、IFN-γ화IL-10수평,이곽종창실험검측지발형초민반응(DTH)반응;HSV-1병독각막공격후,렬극등현미경관찰각막상피병변.결과여pgD단독면역조상비,pIL-2적협동면역가이현저제고IgG2a항체적도、Th세포증식반응화DTH반응,Th세포분비IL-2화IFN-γ수평야현저제고,IL-10수평명현하강.재동물보호실험중,pIL-2적협동면역명현증강료pgD역묘재병독공격시대각막적보호효과.결론IL-2 cDNA적협동면역가이현저제고pgD핵산역묘유도적체액면역화세포면역응답수평,증가핵산역묘적면역보호효과.
