中国人兽共患病杂志
中國人獸共患病雜誌
중국인수공환병잡지
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2005年
7期
587-591
,共5页
鲎抗脂多糖因子%真核表达%COS-7细胞%RT-PCR
鱟抗脂多糖因子%真覈錶達%COS-7細胞%RT-PCR
후항지다당인자%진핵표체%COS-7세포%RT-PCR
目的构建中国鲎的鲎抗脂多糖因子(LALF)基因序列的真核表达载体并尝试其在真核细胞COS-7中的表达.方法从鲎血细胞中提取mRNA,经RT-PCR扩增出LALF的基因片段,将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)中进行酶切鉴定和序列测定,重组载体通过脂质体转染COS-7细胞进行表达,SDS-PAGE分析表达产物.结果酶切鉴定和序列分析证实重组质粒含有LALF的基因片段.经RT-PCR证实转染的COS-7细胞含有LALF的基因序列,经SDS-PAGE分析表明转染重组质粒的COS-7细胞表达融合蛋白.结论 LALF真核表达载体构建成功并实现其在真核细胞COS-7中的表达,为进一步探讨rLALF的生物活性奠定了基础.
目的構建中國鱟的鱟抗脂多糖因子(LALF)基因序列的真覈錶達載體併嘗試其在真覈細胞COS-7中的錶達.方法從鱟血細胞中提取mRNA,經RT-PCR擴增齣LALF的基因片段,將其剋隆入真覈錶達載體pcDNA3.1/myc-His(-)中進行酶切鑒定和序列測定,重組載體通過脂質體轉染COS-7細胞進行錶達,SDS-PAGE分析錶達產物.結果酶切鑒定和序列分析證實重組質粒含有LALF的基因片段.經RT-PCR證實轉染的COS-7細胞含有LALF的基因序列,經SDS-PAGE分析錶明轉染重組質粒的COS-7細胞錶達融閤蛋白.結論 LALF真覈錶達載體構建成功併實現其在真覈細胞COS-7中的錶達,為進一步探討rLALF的生物活性奠定瞭基礎.
목적구건중국후적후항지다당인자(LALF)기인서렬적진핵표체재체병상시기재진핵세포COS-7중적표체.방법종후혈세포중제취mRNA,경RT-PCR확증출LALF적기인편단,장기극륭입진핵표체재체pcDNA3.1/myc-His(-)중진행매절감정화서렬측정,중조재체통과지질체전염COS-7세포진행표체,SDS-PAGE분석표체산물.결과매절감정화서렬분석증실중조질립함유LALF적기인편단.경RT-PCR증실전염적COS-7세포함유LALF적기인서렬,경SDS-PAGE분석표명전염중조질립적COS-7세포표체융합단백.결론 LALF진핵표체재체구건성공병실현기재진핵세포COS-7중적표체,위진일보탐토rLALF적생물활성전정료기출.
