利用反向遗传学技术获得适应RK13细胞的兔出血症病毒
이용반향유전학기술획득괄응RK13세포적토출혈증병독
  • 万方数据
    科学通报 과학통보
    CHINESE SCIENCE BULLETIN
    2006年 13期 1541-1544 ,共4页

    刘光清%倪征%云涛%张玉颖%杜青云%盛祖恬%梁华丽%华炯刚%李双茂%陈剑平

    류광청%예정%운도%장옥영%두청운%성조념%량화려%화형강%리쌍무%진검평

    兔出血症病毒%反向遗传学%全长cDNA%RK13细胞 兔齣血癥病毒%反嚮遺傳學%全長cDNA%RK13細胞
    토출혈증병독%반향유전학%전장cDNA%RK13세포
    在前期构建的兔出血症病毒(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)全长cDNA分子的基础上,利用SP6RNA聚合酶系统,在体外转录合成了病毒RNA.用转染试剂将病毒RNA导入RK13细胞,12 h后可见明显致细胞病变(CPE),用间接免疫荧光方法在RK13细胞中检测到了病毒抗原的产生.将收获的细胞培养物再次接种RK13细胞,仍然能产生明显病变.大量收取细胞培养物,经差速离心法纯化病毒后,在电子显微镜下可观察到RHD病毒粒子.结果表明,利用反向遗传学技术获得了可适应于RK13培养的RHDV,为将来研究RHDV的分子致病机理和新型疫苗等提供了有利的工具.
    재전기구건적토출혈증병독(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)전장cDNA분자적기출상,이용SP6RNA취합매계통,재체외전록합성료병독RNA.용전염시제장병독RNA도입RK13세포,12 h후가견명현치세포병변(CPE),용간접면역형광방법재RK13세포중검측도료병독항원적산생.장수획적세포배양물재차접충RK13세포,잉연능산생명현병변.대량수취세포배양물,경차속리심법순화병독후,재전자현미경하가관찰도RHD병독입자.결과표명,이용반향유전학기술획득료가괄응우RK13배양적RHDV,위장래연구RHDV적분자치병궤리화신형역묘등제공료유리적공구.
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