第四军医大学学报
第四軍醫大學學報
제사군의대학학보
JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2008年
3期
204-207
,共4页
晁晓东%费舟%张磊%李娟%仝武军
晁曉東%費舟%張磊%李娟%仝武軍
조효동%비주%장뢰%리연%동무군
载体蛋白质类%谷氨酸%真核表达载体
載體蛋白質類%穀氨痠%真覈錶達載體
재체단백질류%곡안산%진핵표체재체
目的:克隆大鼠谷氨酸转运蛋白3(EAAT3)的cDNA,构建其真核表达载体并转染Hella细胞.方法:从大鼠的脑组织中提取RNA,采用RT-PCR技术扩增EAAT3的基因编码区序列,将序列定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+). 经酶切及测序鉴定后用阳离子脂质体将其转染到Hella细胞中,通过免疫印迹法鉴定其表达.结果:经双酶切、测序鉴定证实EAAT3基因的真核表达载体构建成功.免疫印迹法证实EAAT3基因的表达.结论:成功克隆了EAAT3编码区序列,并构建了其真核表达载体,为以EAAT3为基础的中枢神经系统疾病的治疗奠定了基础.
目的:剋隆大鼠穀氨痠轉運蛋白3(EAAT3)的cDNA,構建其真覈錶達載體併轉染Hella細胞.方法:從大鼠的腦組織中提取RNA,採用RT-PCR技術擴增EAAT3的基因編碼區序列,將序列定嚮剋隆至真覈錶達載體pcDNA3.1(+). 經酶切及測序鑒定後用暘離子脂質體將其轉染到Hella細胞中,通過免疫印跡法鑒定其錶達.結果:經雙酶切、測序鑒定證實EAAT3基因的真覈錶達載體構建成功.免疫印跡法證實EAAT3基因的錶達.結論:成功剋隆瞭EAAT3編碼區序列,併構建瞭其真覈錶達載體,為以EAAT3為基礎的中樞神經繫統疾病的治療奠定瞭基礎.
목적:극륭대서곡안산전운단백3(EAAT3)적cDNA,구건기진핵표체재체병전염Hella세포.방법:종대서적뇌조직중제취RNA,채용RT-PCR기술확증EAAT3적기인편마구서렬,장서렬정향극륭지진핵표체재체pcDNA3.1(+). 경매절급측서감정후용양리자지질체장기전염도Hella세포중,통과면역인적법감정기표체.결과:경쌍매절、측서감정증실EAAT3기인적진핵표체재체구건성공.면역인적법증실EAAT3기인적표체.결론:성공극륭료EAAT3편마구서렬,병구건료기진핵표체재체,위이EAAT3위기출적중추신경계통질병적치료전정료기출.
