CAJ | 학술논문

[目的]研究植物病毒表达载体pC1YVV/CP/W的构建及用pC1YVV/CP/W表达绿色荧光蛋白(GFP),为植物反应器生产有用蛋白、开发有效的植物病毒载体提供参考.[方法]用三叶草黄脉病毒侵染性全长cDNA克隆pC1YVV基因组的Nib/CP基因之间的一段多克隆位点和两侧含有病毒蛋白酶Nia切割识别序列的多聚脱氧核糖核苷酸接头,构建pC1YVV/CP/W载体,并将绿色荧光蛋白基因插入pC1YVV/CP/W中构建pC1YVV/CP/W/GFP载体,用反转录PCR对重组病毒克隆转录情况进行检测,并用Western杂交对重组病毒克隆表达的目的基因产物进行测定.[结果]pC1YVV/CP/W/GFP接种的蚕豆幼苗表现出与野生型C1YVV相同的症状,发病率达100%,表明重组病毒克隆pC1YVV/CP/W/GFP有侵染性,外源基因的插入没有破坏载体pC1YVV/CP/W的开放阅读框;外源基因在F4子代病毒基因组中稳定存在;重组病毒克隆pC1YVV/CP/W/GFP至少到F4子代病毒能稳定表达GFP.[结论]该研究结果为用植物表达有用蛋白提供了有用的植物病毒载体.
[목적]연구식물병독표체재체pC1YVV/CP/W적구건급용pC1YVV/CP/W표체록색형광단백(GFP),위식물반응기생산유용단백、개발유효적식물병독재체제공삼고.[방법]용삼협초황맥병독침염성전장cDNA극륭pC1YVV기인조적Nib/CP기인지간적일단다극륭위점화량측함유병독단백매Nia절할식별서렬적다취탈양핵당핵감산접두,구건pC1YVV/CP/W재체,병장록색형광단백기인삽입pC1YVV/CP/W중구건pC1YVV/CP/W/GFP재체,용반전록PCR대중조병독극륭전록정황진행검측,병용Western잡교대중조병독극륭표체적목적기인산물진행측정.[결과]pC1YVV/CP/W/GFP접충적잠두유묘표현출여야생형C1YVV상동적증상,발병솔체100%,표명중조병독극륭pC1YVV/CP/W/GFP유침염성,외원기인적삽입몰유파배재체pC1YVV/CP/W적개방열독광;외원기인재F4자대병독기인조중은정존재;중조병독극륭pC1YVV/CP/W/GFP지소도F4자대병독능은정표체GFP.[결론]해연구결과위용식물표체유용단백제공료유용적식물병독재체.