动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2010年
9期
7-11
,共5页
冯新%宋战昀%刘阳%张琼%姜永莉%丁壮
馮新%宋戰昀%劉暘%張瓊%薑永莉%丁壯
풍신%송전윤%류양%장경%강영리%정장
鹅源副黏病毒%F蛋白%毕赤酵母%表达
鵝源副黏病毒%F蛋白%畢赤酵母%錶達
아원부점병독%F단백%필적효모%표체
应用特异性引物,从鹅源副黏病毒NA-1株中扩增出F蛋白基因,PCR产物纯化后克隆入pGEM-T载体,得到重组质粒pT-F.用EcoRⅠ和NotⅠ双酶切pT-F,回收目的基因F片段,并将其定向克隆到pPICZαA中,构建重组质粒pPICZαA-F.用PmeⅠ酶切pPICZαA-F使其线性化,电击转化至感受态毕赤酵母GS115菌中.PCR法鉴定阳性重组子,10 mL/L甲醇诱导表达后,进行SDS-PAGE及Western blot分析.结果表明,在酵母菌培养基上清中检测到相对分子质量为63 ku的重组蛋白,该重组蛋白可与NA-1株鹅源副黏病毒多克隆抗体发生特异性血清学反应.
應用特異性引物,從鵝源副黏病毒NA-1株中擴增齣F蛋白基因,PCR產物純化後剋隆入pGEM-T載體,得到重組質粒pT-F.用EcoRⅠ和NotⅠ雙酶切pT-F,迴收目的基因F片段,併將其定嚮剋隆到pPICZαA中,構建重組質粒pPICZαA-F.用PmeⅠ酶切pPICZαA-F使其線性化,電擊轉化至感受態畢赤酵母GS115菌中.PCR法鑒定暘性重組子,10 mL/L甲醇誘導錶達後,進行SDS-PAGE及Western blot分析.結果錶明,在酵母菌培養基上清中檢測到相對分子質量為63 ku的重組蛋白,該重組蛋白可與NA-1株鵝源副黏病毒多剋隆抗體髮生特異性血清學反應.
응용특이성인물,종아원부점병독NA-1주중확증출F단백기인,PCR산물순화후극륭입pGEM-T재체,득도중조질립pT-F.용EcoRⅠ화NotⅠ쌍매절pT-F,회수목적기인F편단,병장기정향극륭도pPICZαA중,구건중조질립pPICZαA-F.용PmeⅠ매절pPICZαA-F사기선성화,전격전화지감수태필적효모GS115균중.PCR법감정양성중조자,10 mL/L갑순유도표체후,진행SDS-PAGE급Western blot분석.결과표명,재효모균배양기상청중검측도상대분자질량위63 ku적중조단백,해중조단백가여NA-1주아원부점병독다극륭항체발생특이성혈청학반응.
