遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2012年
6期
742-748
,共7页
张高华%王鹤%王旭达%丰明%李怀梅%李树英
張高華%王鶴%王旭達%豐明%李懷梅%李樹英
장고화%왕학%왕욱체%봉명%리부매%리수영
獐茅%高亲和性K+转运蛋白基因(HAK1)%启动子克隆%顺式元件分析%GUS%组织化学染色
獐茅%高親和性K+轉運蛋白基因(HAK1)%啟動子剋隆%順式元件分析%GUS%組織化學染色
장모%고친화성K+전운단백기인(HAK1)%계동자극륭%순식원건분석%GUS%조직화학염색
獐茅高亲和性K+转运蛋白基因(AlHAK1)是从单子叶禾本科盐生植物獐茅(Aeluropus littoralis (Gouan)Parl)中克隆,对于细胞营养和离子渗透调节起关键作用.为了进一步了解AlHAK1 基因的表达调控机制,文章采用基因组步移法分离了AlHAK1 基因转录起始位点上游长度约1.3 kb 的启动子区域.启动子顺式元件分析显示该序列具有典型的TATA 和CAAT 盒,以及一些与植物生长发育和环境响应相关的顺式元件.为了明确AlHAK1 启动子的功能,将其与GUS 基因融合构建到植物表达载体pCAMBIA1301 上,通过农杆菌介导转化法导入水稻中.对转基因植株进行GUS 组织化学染色,结果显示在转化AlHAK1 启动子水稻的根、茎、叶、花药和内外稃部位均检测到GUS 活性.GUS 荧光定量分析显示AlHAK1 启动子调节GUS 表达活性低于组成型启动子CaMV35S 和Ubiquitin,但其根部和茎部的GUS 活性相对较高.对转化植株进行不同胁迫处理后检测GUS活性,结果表明受到ABA、干旱、高温的诱导后其茎部和根部GUS 活性有所提高,推测位于该启动子-682 bp的HSE 元件和-1 268 bp 的MybBS 元件可能在高温、ABA 和干旱诱导的表达调控中起作用.
獐茅高親和性K+轉運蛋白基因(AlHAK1)是從單子葉禾本科鹽生植物獐茅(Aeluropus littoralis (Gouan)Parl)中剋隆,對于細胞營養和離子滲透調節起關鍵作用.為瞭進一步瞭解AlHAK1 基因的錶達調控機製,文章採用基因組步移法分離瞭AlHAK1 基因轉錄起始位點上遊長度約1.3 kb 的啟動子區域.啟動子順式元件分析顯示該序列具有典型的TATA 和CAAT 盒,以及一些與植物生長髮育和環境響應相關的順式元件.為瞭明確AlHAK1 啟動子的功能,將其與GUS 基因融閤構建到植物錶達載體pCAMBIA1301 上,通過農桿菌介導轉化法導入水稻中.對轉基因植株進行GUS 組織化學染色,結果顯示在轉化AlHAK1 啟動子水稻的根、莖、葉、花藥和內外稃部位均檢測到GUS 活性.GUS 熒光定量分析顯示AlHAK1 啟動子調節GUS 錶達活性低于組成型啟動子CaMV35S 和Ubiquitin,但其根部和莖部的GUS 活性相對較高.對轉化植株進行不同脅迫處理後檢測GUS活性,結果錶明受到ABA、榦旱、高溫的誘導後其莖部和根部GUS 活性有所提高,推測位于該啟動子-682 bp的HSE 元件和-1 268 bp 的MybBS 元件可能在高溫、ABA 和榦旱誘導的錶達調控中起作用.
장모고친화성K+전운단백기인(AlHAK1)시종단자협화본과염생식물장모(Aeluropus littoralis (Gouan)Parl)중극륭,대우세포영양화리자삼투조절기관건작용.위료진일보료해AlHAK1 기인적표체조공궤제,문장채용기인조보이법분리료AlHAK1 기인전록기시위점상유장도약1.3 kb 적계동자구역.계동자순식원건분석현시해서렬구유전형적TATA 화CAAT 합,이급일사여식물생장발육화배경향응상관적순식원건.위료명학AlHAK1 계동자적공능,장기여GUS 기인융합구건도식물표체재체pCAMBIA1301 상,통과농간균개도전화법도입수도중.대전기인식주진행GUS 조직화학염색,결과현시재전화AlHAK1 계동자수도적근、경、협、화약화내외부부위균검측도GUS 활성.GUS 형광정량분석현시AlHAK1 계동자조절GUS 표체활성저우조성형계동자CaMV35S 화Ubiquitin,단기근부화경부적GUS 활성상대교고.대전화식주진행불동협박처리후검측GUS활성,결과표명수도ABA、간한、고온적유도후기경부화근부GUS 활성유소제고,추측위우해계동자-682 bp적HSE 원건화-1 268 bp 적MybBS 원건가능재고온、ABA 화간한유도적표체조공중기작용.