中国水产科学
中國水產科學
중국수산과학
Journal of Fishery Sciences of China
2012年
3期
500-508
,共9页
刘志刚%张其中%张占会%崔淼
劉誌剛%張其中%張佔會%崔淼
류지강%장기중%장점회%최묘
近江牡蛎%HSC70基因%溶藻弧菌%基因表达%实时荧光定量PCR
近江牡蠣%HSC70基因%溶藻弧菌%基因錶達%實時熒光定量PCR
근강모려%HSC70기인%용조호균%기인표체%실시형광정량PCR
人工注射溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)感染近江牡蛎(Crassostrea hongkongensis),通过实时荧光定量RT-PCR方法检测了近江牡蛎6种不同组织器官(外套膜、鳃、消化腺、闭壳肌、心脏和血细胞)中HSC70基因表达量的变化;同时采用平板活菌计数法测定了近江牡蛎不同组织器官中溶藻弧菌菌量的变化.结果显示,人工注射感染溶藻弧菌后,近江牡蛎6种组织器官中HSC70基因表达量均显著性升高(P<0.05),且随时间变化均呈现出先升高后恢复至对照水平的趋势;其中鳃组织中HSC70基因分别在第6小时和第72小时出现2次显著性高表达,且在第72小时的表达量高于第6小时(P<0.05).在多数组织器官中,HSC70基因出现显著高表达后便急剧下降至对照水平,而在消化腺中高表达持续的时间长达18 h(第6-24小时).在注射感染溶藻弧菌后第6小时,血细胞中HSC70基因的表达量达到峰值,接近于对照水平的15倍;而在其他组织器官中,该基因表达峰值仅为对照水平的2.5倍左右.人工注射感染溶藻弧菌后3h,3种组织(消化腺、闭壳肌和血淋巴)中均能检测到溶藻弧菌的积累,其中闭壳肌中含菌量最高,6h时闭壳肌中含菌量急剧下降,随后又增加并维持在一定水平直至72 h;消化腺中菌量随着时间推移而增加,到达峰值后又逐步下降;血淋巴中,溶藻弧菌含量整体上随时间不断增加,到48 h稳定在较高水平.各组织中HSC70表达量与溶藻弧菌含量之间存在一定的关联性,尤其在溶藻弧菌攻击的靶器官(消化腺)中最为明显.由此可见,病原菌感染可以诱导近江牡蛎HSC70基因高表达,并且HSC70可能参与了机体抗病原菌感染的相关作用,这为进一步研究近江牡蛎HSC70基因在抗病免疫中的作用机制奠定了基础.
人工註射溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)感染近江牡蠣(Crassostrea hongkongensis),通過實時熒光定量RT-PCR方法檢測瞭近江牡蠣6種不同組織器官(外套膜、鰓、消化腺、閉殼肌、心髒和血細胞)中HSC70基因錶達量的變化;同時採用平闆活菌計數法測定瞭近江牡蠣不同組織器官中溶藻弧菌菌量的變化.結果顯示,人工註射感染溶藻弧菌後,近江牡蠣6種組織器官中HSC70基因錶達量均顯著性升高(P<0.05),且隨時間變化均呈現齣先升高後恢複至對照水平的趨勢;其中鰓組織中HSC70基因分彆在第6小時和第72小時齣現2次顯著性高錶達,且在第72小時的錶達量高于第6小時(P<0.05).在多數組織器官中,HSC70基因齣現顯著高錶達後便急劇下降至對照水平,而在消化腺中高錶達持續的時間長達18 h(第6-24小時).在註射感染溶藻弧菌後第6小時,血細胞中HSC70基因的錶達量達到峰值,接近于對照水平的15倍;而在其他組織器官中,該基因錶達峰值僅為對照水平的2.5倍左右.人工註射感染溶藻弧菌後3h,3種組織(消化腺、閉殼肌和血淋巴)中均能檢測到溶藻弧菌的積纍,其中閉殼肌中含菌量最高,6h時閉殼肌中含菌量急劇下降,隨後又增加併維持在一定水平直至72 h;消化腺中菌量隨著時間推移而增加,到達峰值後又逐步下降;血淋巴中,溶藻弧菌含量整體上隨時間不斷增加,到48 h穩定在較高水平.各組織中HSC70錶達量與溶藻弧菌含量之間存在一定的關聯性,尤其在溶藻弧菌攻擊的靶器官(消化腺)中最為明顯.由此可見,病原菌感染可以誘導近江牡蠣HSC70基因高錶達,併且HSC70可能參與瞭機體抗病原菌感染的相關作用,這為進一步研究近江牡蠣HSC70基因在抗病免疫中的作用機製奠定瞭基礎.
인공주사용조호균(Vibrio alginolyticus)감염근강모려(Crassostrea hongkongensis),통과실시형광정량RT-PCR방법검측료근강모려6충불동조직기관(외투막、새、소화선、폐각기、심장화혈세포)중HSC70기인표체량적변화;동시채용평판활균계수법측정료근강모려불동조직기관중용조호균균량적변화.결과현시,인공주사감염용조호균후,근강모려6충조직기관중HSC70기인표체량균현저성승고(P<0.05),차수시간변화균정현출선승고후회복지대조수평적추세;기중새조직중HSC70기인분별재제6소시화제72소시출현2차현저성고표체,차재제72소시적표체량고우제6소시(P<0.05).재다수조직기관중,HSC70기인출현현저고표체후편급극하강지대조수평,이재소화선중고표체지속적시간장체18 h(제6-24소시).재주사감염용조호균후제6소시,혈세포중HSC70기인적표체량체도봉치,접근우대조수평적15배;이재기타조직기관중,해기인표체봉치부위대조수평적2.5배좌우.인공주사감염용조호균후3h,3충조직(소화선、폐각기화혈림파)중균능검측도용조호균적적루,기중폐각기중함균량최고,6h시폐각기중함균량급극하강,수후우증가병유지재일정수평직지72 h;소화선중균량수착시간추이이증가,도체봉치후우축보하강;혈림파중,용조호균함량정체상수시간불단증가,도48 h은정재교고수평.각조직중HSC70표체량여용조호균함량지간존재일정적관련성,우기재용조호균공격적파기관(소화선)중최위명현.유차가견,병원균감염가이유도근강모려HSC70기인고표체,병차HSC70가능삼여료궤체항병원균감염적상관작용,저위진일보연구근강모려HSC70기인재항병면역중적작용궤제전정료기출.