眼科研究
眼科研究
안과연구
CHINESE OPHTHALMIC RESEARCH
2006年
3期
281-284
,共4页
王继兵%葛坚%段山%刘炳乾%郑建樑
王繼兵%葛堅%段山%劉炳乾%鄭建樑
왕계병%갈견%단산%류병건%정건량
旁观者效应%HSV-tk基因%Tenon囊%成纤维细胞%人
徬觀者效應%HSV-tk基因%Tenon囊%成纖維細胞%人
방관자효응%HSV-tk기인%Tenon낭%성섬유세포%인
目的观察HSV-tk/GCV系统对人Tenon囊成纤维细胞(HTFs)的旁观者效应并研究其作用机制.方法将转HSV-tk基因HTFs(HTFs-tk)与正常HTFs于两种接种密度下以不同比例混合,加入5μg/ml更昔洛韦作用5 d,MTT法检测对HTFs的杀伤作用;染料传输法观察HTFs细胞间隙连接细胞间通讯(GJIC)的能力;免疫细胞化学检测Cx43分布;RT-PCR及Western blot检测Cx43表达.结果旁观者效应随HTFs-tk/HTFs比例增加而增强,高细胞接种密度组明显强于低密度组;染料通过GJIC传输6级以上;Cx43主要分布于HTFs细胞膜并检测到其mRNA与蛋白表达.结论旁观者效应需要细胞间密切接触,Cx43介导GJIC可能是HSV-TK/GCV系统对HTFs产生旁观者效应的主要机制,HTFs表达Cx43可能在结膜伤口愈合反应中发挥重要作用.
目的觀察HSV-tk/GCV繫統對人Tenon囊成纖維細胞(HTFs)的徬觀者效應併研究其作用機製.方法將轉HSV-tk基因HTFs(HTFs-tk)與正常HTFs于兩種接種密度下以不同比例混閤,加入5μg/ml更昔洛韋作用5 d,MTT法檢測對HTFs的殺傷作用;染料傳輸法觀察HTFs細胞間隙連接細胞間通訊(GJIC)的能力;免疫細胞化學檢測Cx43分佈;RT-PCR及Western blot檢測Cx43錶達.結果徬觀者效應隨HTFs-tk/HTFs比例增加而增彊,高細胞接種密度組明顯彊于低密度組;染料通過GJIC傳輸6級以上;Cx43主要分佈于HTFs細胞膜併檢測到其mRNA與蛋白錶達.結論徬觀者效應需要細胞間密切接觸,Cx43介導GJIC可能是HSV-TK/GCV繫統對HTFs產生徬觀者效應的主要機製,HTFs錶達Cx43可能在結膜傷口愈閤反應中髮揮重要作用.
목적관찰HSV-tk/GCV계통대인Tenon낭성섬유세포(HTFs)적방관자효응병연구기작용궤제.방법장전HSV-tk기인HTFs(HTFs-tk)여정상HTFs우량충접충밀도하이불동비례혼합,가입5μg/ml경석락위작용5 d,MTT법검측대HTFs적살상작용;염료전수법관찰HTFs세포간극련접세포간통신(GJIC)적능력;면역세포화학검측Cx43분포;RT-PCR급Western blot검측Cx43표체.결과방관자효응수HTFs-tk/HTFs비례증가이증강,고세포접충밀도조명현강우저밀도조;염료통과GJIC전수6급이상;Cx43주요분포우HTFs세포막병검측도기mRNA여단백표체.결론방관자효응수요세포간밀절접촉,Cx43개도GJIC가능시HSV-TK/GCV계통대HTFs산생방관자효응적주요궤제,HTFs표체Cx43가능재결막상구유합반응중발휘중요작용.
