植物病理学报
植物病理學報
식물병이학보
ACTA PHYTOPATHOLOGICA SINICA
2006年
4期
301-305
,共5页
刘成科%吴建祥%洪健%周雪平%叶美琴
劉成科%吳建祥%洪健%週雪平%葉美琴
류성과%오건상%홍건%주설평%협미금
百合无症病毒%I-ELISA%TAS-ELISA%DAS-ELISA
百閤無癥病毒%I-ELISA%TAS-ELISA%DAS-ELISA
백합무증병독%I-ELISA%TAS-ELISA%DAS-ELISA
以抗百合无症病毒(Lily symptomless virus,LSV)的单克隆抗体为核心,建立了间接ELISA(I-ELISA)和三抗体夹心ELISA(TAS-ELISA)的检测方法.I-ELISA检测体系中,病叶汁液和单克隆抗体腹水的工作浓度分别为1∶20和1∶6 000,对病叶汁液的检测灵敏度达到了1∶2 560,可检测到提纯病毒绝对量为1.35 ng.TAS-ELISA检测体系中捕获抗体和单克隆抗体腹水的工作浓度分别为1∶200和1∶6 000,检测病叶汁液的灵敏度达到了1∶5 120,对于提纯病毒可检测到0.68ng.使用美国Agdia公司双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)检测试剂盒对病叶汁液的检测灵敏度为1∶2 560,提纯病毒检出量1.35 ng.用3种ELISA方法检测了采自浙江省丽水市的46个田间样品,I-ELISA、TAS-ELISA和DAS-ELISA测出的阳性样品数分别为19、21和18个,阳性率为41%、46%和39%.灵敏度检测和田间样品检测结果显示,TAS-ELISA的灵敏度高于DAS-ELISA和I-ELISA.相同样品I-ELISA所测出的OD405值和P/N值普遍高于DAS-ELISA,表明LSV单抗比多抗具有更强的特异性和更高的灵敏度.
以抗百閤無癥病毒(Lily symptomless virus,LSV)的單剋隆抗體為覈心,建立瞭間接ELISA(I-ELISA)和三抗體夾心ELISA(TAS-ELISA)的檢測方法.I-ELISA檢測體繫中,病葉汁液和單剋隆抗體腹水的工作濃度分彆為1∶20和1∶6 000,對病葉汁液的檢測靈敏度達到瞭1∶2 560,可檢測到提純病毒絕對量為1.35 ng.TAS-ELISA檢測體繫中捕穫抗體和單剋隆抗體腹水的工作濃度分彆為1∶200和1∶6 000,檢測病葉汁液的靈敏度達到瞭1∶5 120,對于提純病毒可檢測到0.68ng.使用美國Agdia公司雙抗體夾心ELISA(DAS-ELISA)檢測試劑盒對病葉汁液的檢測靈敏度為1∶2 560,提純病毒檢齣量1.35 ng.用3種ELISA方法檢測瞭採自浙江省麗水市的46箇田間樣品,I-ELISA、TAS-ELISA和DAS-ELISA測齣的暘性樣品數分彆為19、21和18箇,暘性率為41%、46%和39%.靈敏度檢測和田間樣品檢測結果顯示,TAS-ELISA的靈敏度高于DAS-ELISA和I-ELISA.相同樣品I-ELISA所測齣的OD405值和P/N值普遍高于DAS-ELISA,錶明LSV單抗比多抗具有更彊的特異性和更高的靈敏度.
이항백합무증병독(Lily symptomless virus,LSV)적단극륭항체위핵심,건립료간접ELISA(I-ELISA)화삼항체협심ELISA(TAS-ELISA)적검측방법.I-ELISA검측체계중,병협즙액화단극륭항체복수적공작농도분별위1∶20화1∶6 000,대병협즙액적검측령민도체도료1∶2 560,가검측도제순병독절대량위1.35 ng.TAS-ELISA검측체계중포획항체화단극륭항체복수적공작농도분별위1∶200화1∶6 000,검측병협즙액적령민도체도료1∶5 120,대우제순병독가검측도0.68ng.사용미국Agdia공사쌍항체협심ELISA(DAS-ELISA)검측시제합대병협즙액적검측령민도위1∶2 560,제순병독검출량1.35 ng.용3충ELISA방법검측료채자절강성려수시적46개전간양품,I-ELISA、TAS-ELISA화DAS-ELISA측출적양성양품수분별위19、21화18개,양성솔위41%、46%화39%.령민도검측화전간양품검측결과현시,TAS-ELISA적령민도고우DAS-ELISA화I-ELISA.상동양품I-ELISA소측출적OD405치화P/N치보편고우DAS-ELISA,표명LSV단항비다항구유경강적특이성화경고적령민도.