热带医学杂志
熱帶醫學雜誌
열대의학잡지
JOURNAL OF TROPICAL MEDICINE
2006年
10期
1068-1070,1119
,共4页
杨树国%王雅静%帖超男%谢辉%毕世樑%刘佩娜%廖琳
楊樹國%王雅靜%帖超男%謝輝%畢世樑%劉珮娜%廖琳
양수국%왕아정%첩초남%사휘%필세량%류패나%료림
阴道毛滴虫%黏附蛋白33%真核表达载体
陰道毛滴蟲%黏附蛋白33%真覈錶達載體
음도모적충%점부단백33%진핵표체재체
目的 构建并鉴定阴道毛滴虫黏附蛋白33基因(adhesion protein 33 gene,ap33 gene)真核表达载体.方法 提取阴道毛滴虫分离株基因组DNA,PCR扩增黏附蛋白33基因,克隆入pMD-18T线性质粒,重组子经双酶切、PCR鉴定及测序分析.鉴定出的重组质粒pMD-18T-ap33和pcDNA3.1(+)空质粒经BamH Ⅰ和Xba Ⅰ限制性内切酶双酶切,凝胶电泳后回收ap33目的基因和pcDNA3.1(+)空质粒酶切片段,将ap33基因亚克隆入pcDNA3.1(+)载体并进行筛选和鉴定.结果 PCR扩增出阴道毛滴虫黏附蛋白33基因,重组质粒pMD-18T-ap33经双酶切,PCR及序列分析,ap33基因的长度为930 bp,与GenBank上公布的ap33基因序列同源性达99%.经凝胶电泳、PCR鉴定和限制性酶切鉴定,构建出pcDNA3.1(+)-ap33重组质粒.结论 成功构建了阴道毛滴虫pMD-18T-ap33克隆质粒及pcDNA3.1(+)-ap33重组质粒.
目的 構建併鑒定陰道毛滴蟲黏附蛋白33基因(adhesion protein 33 gene,ap33 gene)真覈錶達載體.方法 提取陰道毛滴蟲分離株基因組DNA,PCR擴增黏附蛋白33基因,剋隆入pMD-18T線性質粒,重組子經雙酶切、PCR鑒定及測序分析.鑒定齣的重組質粒pMD-18T-ap33和pcDNA3.1(+)空質粒經BamH Ⅰ和Xba Ⅰ限製性內切酶雙酶切,凝膠電泳後迴收ap33目的基因和pcDNA3.1(+)空質粒酶切片段,將ap33基因亞剋隆入pcDNA3.1(+)載體併進行篩選和鑒定.結果 PCR擴增齣陰道毛滴蟲黏附蛋白33基因,重組質粒pMD-18T-ap33經雙酶切,PCR及序列分析,ap33基因的長度為930 bp,與GenBank上公佈的ap33基因序列同源性達99%.經凝膠電泳、PCR鑒定和限製性酶切鑒定,構建齣pcDNA3.1(+)-ap33重組質粒.結論 成功構建瞭陰道毛滴蟲pMD-18T-ap33剋隆質粒及pcDNA3.1(+)-ap33重組質粒.
목적 구건병감정음도모적충점부단백33기인(adhesion protein 33 gene,ap33 gene)진핵표체재체.방법 제취음도모적충분리주기인조DNA,PCR확증점부단백33기인,극륭입pMD-18T선성질립,중조자경쌍매절、PCR감정급측서분석.감정출적중조질립pMD-18T-ap33화pcDNA3.1(+)공질립경BamH Ⅰ화Xba Ⅰ한제성내절매쌍매절,응효전영후회수ap33목적기인화pcDNA3.1(+)공질립매절편단,장ap33기인아극륭입pcDNA3.1(+)재체병진행사선화감정.결과 PCR확증출음도모적충점부단백33기인,중조질립pMD-18T-ap33경쌍매절,PCR급서렬분석,ap33기인적장도위930 bp,여GenBank상공포적ap33기인서렬동원성체99%.경응효전영、PCR감정화한제성매절감정,구건출pcDNA3.1(+)-ap33중조질립.결론 성공구건료음도모적충pMD-18T-ap33극륭질립급pcDNA3.1(+)-ap33중조질립.
