细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2007年
2期
113-116
,共4页
冯宇%万敏%王宣军%张培因%于永利%王丽颖
馮宇%萬敏%王宣軍%張培因%于永利%王麗穎
풍우%만민%왕선군%장배인%우영리%왕려영
SARS冠状病毒刺突蛋白%B细胞表位预测%伴侣10分子%S2亚基
SARS冠狀病毒刺突蛋白%B細胞錶位預測%伴侶10分子%S2亞基
SARS관상병독자돌단백%B세포표위예측%반려10분자%S2아기
目的:研究预测的SARS冠状病毒刺突蛋白S2亚基B细胞表位肽在大肠杆菌中的表达及其模拟S2蛋白的抗原性.方法:用DNAStar软件对S2亚基序列进行分析,预测B细胞表位所在肽段.通过4轮PCR反应人工搭建预测表位cDNA序列并克隆到含有伴侣10基因的pET28a(+)载体中,构成重组载体pET28-chap10-S2epi.重组蛋白Chap10-S2epi在E.coli BL21(DE3)中表达并以SDS-PAGE和Western blot进行鉴定.用纯化的chap10-S2epi免疫家兔制备抗血清,并通过ELISA判断Chap10-S2epi的抗原性.结果:成功构建并在大肠杆菌中表达了Chap10-S2pei融合蛋白.Chap10-S2epi免疫的抗血清能识别真核细胞表达的SARS冠状病毒全长S2刺突蛋白.结论:预测的SARS冠状病毒S2刺突蛋白B细胞表位肽能够诱导家兔产生针对S2蛋白的抗体,为研制抗SARS病毒基因工程疫苗奠定了基础.
目的:研究預測的SARS冠狀病毒刺突蛋白S2亞基B細胞錶位肽在大腸桿菌中的錶達及其模擬S2蛋白的抗原性.方法:用DNAStar軟件對S2亞基序列進行分析,預測B細胞錶位所在肽段.通過4輪PCR反應人工搭建預測錶位cDNA序列併剋隆到含有伴侶10基因的pET28a(+)載體中,構成重組載體pET28-chap10-S2epi.重組蛋白Chap10-S2epi在E.coli BL21(DE3)中錶達併以SDS-PAGE和Western blot進行鑒定.用純化的chap10-S2epi免疫傢兔製備抗血清,併通過ELISA判斷Chap10-S2epi的抗原性.結果:成功構建併在大腸桿菌中錶達瞭Chap10-S2pei融閤蛋白.Chap10-S2epi免疫的抗血清能識彆真覈細胞錶達的SARS冠狀病毒全長S2刺突蛋白.結論:預測的SARS冠狀病毒S2刺突蛋白B細胞錶位肽能夠誘導傢兔產生針對S2蛋白的抗體,為研製抗SARS病毒基因工程疫苗奠定瞭基礎.
목적:연구예측적SARS관상병독자돌단백S2아기B세포표위태재대장간균중적표체급기모의S2단백적항원성.방법:용DNAStar연건대S2아기서렬진행분석,예측B세포표위소재태단.통과4륜PCR반응인공탑건예측표위cDNA서렬병극륭도함유반려10기인적pET28a(+)재체중,구성중조재체pET28-chap10-S2epi.중조단백Chap10-S2epi재E.coli BL21(DE3)중표체병이SDS-PAGE화Western blot진행감정.용순화적chap10-S2epi면역가토제비항혈청,병통과ELISA판단Chap10-S2epi적항원성.결과:성공구건병재대장간균중표체료Chap10-S2pei융합단백.Chap10-S2epi면역적항혈청능식별진핵세포표체적SARS관상병독전장S2자돌단백.결론:예측적SARS관상병독S2자돌단백B세포표위태능구유도가토산생침대S2단백적항체,위연제항SARS병독기인공정역묘전정료기출.
