中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2008年
6期
479-482
,共4页
胡圣尧%聂志妍%王尊生%袁勤生
鬍聖堯%聶誌妍%王尊生%袁勤生
호골요%섭지연%왕존생%원근생
重组蛹虫草超氧化物岐化酶%脱辅基蛋白%表达%纯化%活性重建
重組蛹蟲草超氧化物岐化酶%脫輔基蛋白%錶達%純化%活性重建
중조용충초초양화물기화매%탈보기단백%표체%순화%활성중건
目的 表达并纯化重组蛹虫草超氧化物歧化酶脱辅基蛋白,并考查各种金属离子对其活性重建的作用.方法 用不含Cu2+和Zn2+的培养基培养重组菌株,并表达重组蛋白,采用DEAE-FF和CM-52进行纯化;在脱辅基蛋白溶液中加入Cu2+、Mn2+、Mg2+、Ni2+Ag+,测定SOD酶活力的变化.结果 蛹虫草脱辅基Cu,Zn-SOD在不含Cu2+和Zn2+的培养基中得到表达,纯化后的样品经SDS-PAGE分析,在相对分子质量17 000处出现单一条带,经活性电泳分析无酶活力;脱辅基蛋白活性重建的最适宜Cu2+浓度为0.005 mmol/L,但其紫外吸收图谱与天然SOD不同;0.1mmol/L的Mn2+、Mn2+、Ni2+、Ag2+重建的酶活力远低于Cu2+重建的cm-SOD的酶活力.结论 已成功表达并纯化了蛹虫草脱辅基Cu,Zn-SOD,各种金属离子只能有限地重建脱辅基Cu,Zn-SOD的活性.
目的 錶達併純化重組蛹蟲草超氧化物歧化酶脫輔基蛋白,併攷查各種金屬離子對其活性重建的作用.方法 用不含Cu2+和Zn2+的培養基培養重組菌株,併錶達重組蛋白,採用DEAE-FF和CM-52進行純化;在脫輔基蛋白溶液中加入Cu2+、Mn2+、Mg2+、Ni2+Ag+,測定SOD酶活力的變化.結果 蛹蟲草脫輔基Cu,Zn-SOD在不含Cu2+和Zn2+的培養基中得到錶達,純化後的樣品經SDS-PAGE分析,在相對分子質量17 000處齣現單一條帶,經活性電泳分析無酶活力;脫輔基蛋白活性重建的最適宜Cu2+濃度為0.005 mmol/L,但其紫外吸收圖譜與天然SOD不同;0.1mmol/L的Mn2+、Mn2+、Ni2+、Ag2+重建的酶活力遠低于Cu2+重建的cm-SOD的酶活力.結論 已成功錶達併純化瞭蛹蟲草脫輔基Cu,Zn-SOD,各種金屬離子隻能有限地重建脫輔基Cu,Zn-SOD的活性.
목적 표체병순화중조용충초초양화물기화매탈보기단백,병고사각충금속리자대기활성중건적작용.방법 용불함Cu2+화Zn2+적배양기배양중조균주,병표체중조단백,채용DEAE-FF화CM-52진행순화;재탈보기단백용액중가입Cu2+、Mn2+、Mg2+、Ni2+Ag+,측정SOD매활력적변화.결과 용충초탈보기Cu,Zn-SOD재불함Cu2+화Zn2+적배양기중득도표체,순화후적양품경SDS-PAGE분석,재상대분자질량17 000처출현단일조대,경활성전영분석무매활력;탈보기단백활성중건적최괄의Cu2+농도위0.005 mmol/L,단기자외흡수도보여천연SOD불동;0.1mmol/L적Mn2+、Mn2+、Ni2+、Ag2+중건적매활력원저우Cu2+중건적cm-SOD적매활력.결론 이성공표체병순화료용충초탈보기Cu,Zn-SOD,각충금속리자지능유한지중건탈보기Cu,Zn-SOD적활성.
