中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2009年
10期
931-934,939
,共5页
吴德平%王颖%王锡乐%陈梅玲%温博海
吳德平%王穎%王錫樂%陳梅玲%溫博海
오덕평%왕영%왕석악%진매령%온박해
立氏立克次体%抗原相关基因%重组蛋白%免疫印迹
立氏立剋次體%抗原相關基因%重組蛋白%免疫印跡
립씨립극차체%항원상관기인%중조단백%면역인적
目的 表达立氏立克次体(Rickettsia rickettsii)主要抗原基因，免疫印迹初步分析重组蛋白抗原的抗原性。方法 根据立氏立克次体全基因组序列选出主要抗原相关基因，采用PCR从全基因组中扩增抗原相关基因，将扩得的基因片段插入原核表达质粒构建抗原基因重组表达质粒，将重组质粒转化大肠杆菌并诱导转化菌表达重组蛋白抗原。采用立氏立克次体感染的豚鼠血清和斑点热患者血清分别与纯化的重组蛋白抗原做免疫印迹分析。结果 经PCR扩增后获得43个目的基因片段，其中36个基因片段在大肠杆菌中高效表达重组蛋白抗原，其中5个蛋白抗原在免疫印迹中与感染豚鼠血清和斑点热患者血清反应均为阳性。结论 免疫印迹筛选出5种立氏立克次体重组蛋白抗原，结果提示它们是能够诱导机体产生特异性免疫应答的主要抗原，可作研制斑点热诊断试剂或亚单位疫苗的新候选蛋白抗原。
目的 錶達立氏立剋次體(Rickettsia rickettsii)主要抗原基因，免疫印跡初步分析重組蛋白抗原的抗原性。方法 根據立氏立剋次體全基因組序列選齣主要抗原相關基因，採用PCR從全基因組中擴增抗原相關基因，將擴得的基因片段插入原覈錶達質粒構建抗原基因重組錶達質粒，將重組質粒轉化大腸桿菌併誘導轉化菌錶達重組蛋白抗原。採用立氏立剋次體感染的豚鼠血清和斑點熱患者血清分彆與純化的重組蛋白抗原做免疫印跡分析。結果 經PCR擴增後穫得43箇目的基因片段，其中36箇基因片段在大腸桿菌中高效錶達重組蛋白抗原，其中5箇蛋白抗原在免疫印跡中與感染豚鼠血清和斑點熱患者血清反應均為暘性。結論 免疫印跡篩選齣5種立氏立剋次體重組蛋白抗原，結果提示它們是能夠誘導機體產生特異性免疫應答的主要抗原，可作研製斑點熱診斷試劑或亞單位疫苗的新候選蛋白抗原。
목적 표체립씨립극차체(Rickettsia rickettsii)주요항원기인，면역인적초보분석중조단백항원적항원성。방법 근거립씨립극차체전기인조서렬선출주요항원상관기인，채용PCR종전기인조중확증항원상관기인，장확득적기인편단삽입원핵표체질립구건항원기인중조표체질립，장중조질립전화대장간균병유도전화균표체중조단백항원。채용립씨립극차체감염적돈서혈청화반점열환자혈청분별여순화적중조단백항원주면역인적분석。결과 경PCR확증후획득43개목적기인편단，기중36개기인편단재대장간균중고효표체중조단백항원，기중5개단백항원재면역인적중여감염돈서혈청화반점열환자혈청반응균위양성。결론 면역인적사선출5충립씨립극차체중조단백항원，결과제시타문시능구유도궤체산생특이성면역응답적주요항원，가작연제반점열진단시제혹아단위역묘적신후선단백항원。
