热带生物学报
熱帶生物學報
열대생물학보
JOURNAL OF SOUTH CHINA UNIVERSITY OF TROPICAL AGRICULTURE
2010年
2期
99-104
,共6页
李传代%陈飞%王天地%刘国民
李傳代%陳飛%王天地%劉國民
리전대%진비%왕천지%류국민
女贞%ISSR%影响因子%体系优化
女貞%ISSR%影響因子%體繫優化
녀정%ISSR%영향인자%체계우화
利用单因子试验,测试了女贞ISSR-PCR 反应体系中的主要影响因子.经过优化实验,建立了一套适合于女贞的稳定的ISSR-PCR 反应体系:10× buffer 2.5 μL,2.0 mmol·L-1 的MgCl2,200 μmol·L-1 的dNTPs,1.5 U的Taq 酶,0.4的μmol·L-1 的引物,10 ng的DNA 模板.PCR 扩增程序为:94 ℃预变性4 min,94 ℃变性40 s,52～62 ℃退火45 s,72 ℃延伸120 s,进行35 个循环,72 ℃延伸8 min,4 ℃保存.应用该优化的ISSR-PCR 实验体系对12 份女贞种质材料进行了扩增,均能扩增出丰富稳定的条带.
利用單因子試驗,測試瞭女貞ISSR-PCR 反應體繫中的主要影響因子.經過優化實驗,建立瞭一套適閤于女貞的穩定的ISSR-PCR 反應體繫:10× buffer 2.5 μL,2.0 mmol·L-1 的MgCl2,200 μmol·L-1 的dNTPs,1.5 U的Taq 酶,0.4的μmol·L-1 的引物,10 ng的DNA 模闆.PCR 擴增程序為:94 ℃預變性4 min,94 ℃變性40 s,52～62 ℃退火45 s,72 ℃延伸120 s,進行35 箇循環,72 ℃延伸8 min,4 ℃保存.應用該優化的ISSR-PCR 實驗體繫對12 份女貞種質材料進行瞭擴增,均能擴增齣豐富穩定的條帶.
이용단인자시험,측시료녀정ISSR-PCR 반응체계중적주요영향인자.경과우화실험,건립료일투괄합우녀정적은정적ISSR-PCR 반응체계:10× buffer 2.5 μL,2.0 mmol·L-1 적MgCl2,200 μmol·L-1 적dNTPs,1.5 U적Taq 매,0.4적μmol·L-1 적인물,10 ng적DNA 모판.PCR 확증정서위:94 ℃예변성4 min,94 ℃변성40 s,52～62 ℃퇴화45 s,72 ℃연신120 s,진행35 개순배,72 ℃연신8 min,4 ℃보존.응용해우화적ISSR-PCR 실험체계대12 빈녀정충질재료진행료확증,균능확증출봉부은정적조대.
