重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2012年
6期
524-526
,共3页
熊江红%张庆华%张艳妮%朱向东%孔令保
熊江紅%張慶華%張豔妮%硃嚮東%孔令保
웅강홍%장경화%장염니%주향동%공령보
肝炎病毒属%内质网应激反应%HepG2细胞%NS4B蛋白
肝炎病毒屬%內質網應激反應%HepG2細胞%NS4B蛋白
간염병독속%내질망응격반응%HepG2세포%NS4B단백
目的 研究持续表达的丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白4B(NS4B)对HepG2细胞内质网应激反应的影响.方法 NS4B重组真核表达质粒pcDNA3.1(-)NS4B通过脂质体转染HepG2细胞,G418筛选、基因组PCR和Western blot鉴定稳定转染细胞;RT-PCR检测稳定转染细胞内人X盒结合蛋白1(XBP1) mRNA剪接,荧光素酶试验检测稳定转染细胞内GRP78启动子、XBP1启动子和核因子κB(NF-κB)活性.结果 基因组PCR和Western blot鉴定证实NS4B基因整合到转染HepG2细胞的染色体上,并有效表达;在NS4B稳定转染的HepG2细胞中,检测到XBP1 mRNA剪接、XBP1和Grp78启动子激活、Ca2+稳态变化及NF-κB激活.结论 NS4B在HepG2的稳定表达诱导了内质网应激反应,揭示NS4B可能通过诱导肝细胞内质网应激反应在HCV感染及其致病性中发挥作用.
目的 研究持續錶達的丙型肝炎病毒(HCV)非結構蛋白4B(NS4B)對HepG2細胞內質網應激反應的影響.方法 NS4B重組真覈錶達質粒pcDNA3.1(-)NS4B通過脂質體轉染HepG2細胞,G418篩選、基因組PCR和Western blot鑒定穩定轉染細胞;RT-PCR檢測穩定轉染細胞內人X盒結閤蛋白1(XBP1) mRNA剪接,熒光素酶試驗檢測穩定轉染細胞內GRP78啟動子、XBP1啟動子和覈因子κB(NF-κB)活性.結果 基因組PCR和Western blot鑒定證實NS4B基因整閤到轉染HepG2細胞的染色體上,併有效錶達;在NS4B穩定轉染的HepG2細胞中,檢測到XBP1 mRNA剪接、XBP1和Grp78啟動子激活、Ca2+穩態變化及NF-κB激活.結論 NS4B在HepG2的穩定錶達誘導瞭內質網應激反應,揭示NS4B可能通過誘導肝細胞內質網應激反應在HCV感染及其緻病性中髮揮作用.
목적 연구지속표체적병형간염병독(HCV)비결구단백4B(NS4B)대HepG2세포내질망응격반응적영향.방법 NS4B중조진핵표체질립pcDNA3.1(-)NS4B통과지질체전염HepG2세포,G418사선、기인조PCR화Western blot감정은정전염세포;RT-PCR검측은정전염세포내인X합결합단백1(XBP1) mRNA전접,형광소매시험검측은정전염세포내GRP78계동자、XBP1계동자화핵인자κB(NF-κB)활성.결과 기인조PCR화Western blot감정증실NS4B기인정합도전염HepG2세포적염색체상,병유효표체;재NS4B은정전염적HepG2세포중,검측도XBP1 mRNA전접、XBP1화Grp78계동자격활、Ca2+은태변화급NF-κB격활.결론 NS4B재HepG2적은정표체유도료내질망응격반응,게시NS4B가능통과유도간세포내질망응격반응재HCV감염급기치병성중발휘작용.
