解剖学研究
解剖學研究
해부학연구
ANATOMY RESEARCH
2012年
2期
107-110
,共4页
脑源性神经生长因子%基因克隆%增强型绿色荧光蛋白
腦源性神經生長因子%基因剋隆%增彊型綠色熒光蛋白
뇌원성신경생장인자%기인극륭%증강형록색형광단백
目的 将脑源性神经生长因子(BDNF)构建到表达质粒(pEGFP-N1)上.方法 本实验采用RT-PCR的方法,从大鼠海马总RNA中扩增目的基因,分别用一步法(直接构建到表达载体上)和两步法(先构建到克隆载体再构建到表达载体上)构建重组载体,通过酶切和基因测序筛选鉴定正确的阳性克隆,并对两种方法做简单的比较.结果 两种方法构建的重组载体都插入了正确的序列.两步法的转染效率明显高于一步法,但一步法也同样得到了正确的阳性克隆.结论 成功构建了pEGFP-BDNF重组表达载体.
目的 將腦源性神經生長因子(BDNF)構建到錶達質粒(pEGFP-N1)上.方法 本實驗採用RT-PCR的方法,從大鼠海馬總RNA中擴增目的基因,分彆用一步法(直接構建到錶達載體上)和兩步法(先構建到剋隆載體再構建到錶達載體上)構建重組載體,通過酶切和基因測序篩選鑒定正確的暘性剋隆,併對兩種方法做簡單的比較.結果 兩種方法構建的重組載體都插入瞭正確的序列.兩步法的轉染效率明顯高于一步法,但一步法也同樣得到瞭正確的暘性剋隆.結論 成功構建瞭pEGFP-BDNF重組錶達載體.
목적 장뇌원성신경생장인자(BDNF)구건도표체질립(pEGFP-N1)상.방법 본실험채용RT-PCR적방법,종대서해마총RNA중확증목적기인,분별용일보법(직접구건도표체재체상)화량보법(선구건도극륭재체재구건도표체재체상)구건중조재체,통과매절화기인측서사선감정정학적양성극륭,병대량충방법주간단적비교.결과 량충방법구건적중조재체도삽입료정학적서렬.량보법적전염효솔명현고우일보법,단일보법야동양득도료정학적양성극륭.결론 성공구건료pEGFP-BDNF중조표체재체.
