中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2010年
6期
1052-1058
,共7页
夏雪%张怀勤%贾红梅%林以诺%黄伟剑%叶盛%邵小琳
夏雪%張懷勤%賈紅梅%林以諾%黃偉劍%葉盛%邵小琳
하설%장부근%가홍매%림이낙%황위검%협성%소소림
精氨酸%内皮生长晕细胞%细胞凋亡%p38MAPK
精氨痠%內皮生長暈細胞%細胞凋亡%p38MAPK
정안산%내피생장훈세포%세포조망%p38MAPK
目的:探讨非对称性二甲基精氨酸(ADMA)对内皮生长晕细胞(EOCs)凋亡和黏附能力的影响以及凋亡相关p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)表达水平的变化.方法:分离脐血中单个核细胞并原代培养扩增内皮生长晕细胞,免疫细胞化学染色和荧光染色法鉴定其内皮细胞特性.将浓度为0、1、5、10、30 μmol/L ADMA与内皮生长晕细胞作用48 h,流式细胞仪检测细胞凋亡率,DAPI染色及AnnexinV/PI双染观察凋亡细胞核形态变化.在倒置显微镜下观察计数重黏附细胞数来测定细胞黏附能力.用特异性的 phospho-p38MAPK抗体的Western blotting检测p38MAPK的活性.结果:采用贴壁法培养的细胞具有多种内皮细胞特性.ADMA(1-30 μmol/L)诱导内皮生长晕细胞的凋亡(P<0.01),同时ADMA(5-30 μmol/L)使phospho-p38MAPK蛋白表达增加,两者作用均呈浓度依赖性.ADMA作用组和对照组相比,激光共聚焦显微镜下可见更显著的细胞凋亡形态学改变.除1 μmol/L ADMA外,5、10、30 μmol/L ADMA均可抑制内皮生长晕细胞的黏附能力.结论:ADMA能诱导内皮生长晕细胞发生凋亡并抑制其黏附能力,ADMA诱导内皮生长晕细胞发生凋亡可能与p38 MAPK磷酸化水平上升有关.
目的:探討非對稱性二甲基精氨痠(ADMA)對內皮生長暈細胞(EOCs)凋亡和黏附能力的影響以及凋亡相關p38絲裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)錶達水平的變化.方法:分離臍血中單箇覈細胞併原代培養擴增內皮生長暈細胞,免疫細胞化學染色和熒光染色法鑒定其內皮細胞特性.將濃度為0、1、5、10、30 μmol/L ADMA與內皮生長暈細胞作用48 h,流式細胞儀檢測細胞凋亡率,DAPI染色及AnnexinV/PI雙染觀察凋亡細胞覈形態變化.在倒置顯微鏡下觀察計數重黏附細胞數來測定細胞黏附能力.用特異性的 phospho-p38MAPK抗體的Western blotting檢測p38MAPK的活性.結果:採用貼壁法培養的細胞具有多種內皮細胞特性.ADMA(1-30 μmol/L)誘導內皮生長暈細胞的凋亡(P<0.01),同時ADMA(5-30 μmol/L)使phospho-p38MAPK蛋白錶達增加,兩者作用均呈濃度依賴性.ADMA作用組和對照組相比,激光共聚焦顯微鏡下可見更顯著的細胞凋亡形態學改變.除1 μmol/L ADMA外,5、10、30 μmol/L ADMA均可抑製內皮生長暈細胞的黏附能力.結論:ADMA能誘導內皮生長暈細胞髮生凋亡併抑製其黏附能力,ADMA誘導內皮生長暈細胞髮生凋亡可能與p38 MAPK燐痠化水平上升有關.
목적:탐토비대칭성이갑기정안산(ADMA)대내피생장훈세포(EOCs)조망화점부능력적영향이급조망상관p38사렬소활화단백격매(p38MAPK)표체수평적변화.방법:분리제혈중단개핵세포병원대배양확증내피생장훈세포,면역세포화학염색화형광염색법감정기내피세포특성.장농도위0、1、5、10、30 μmol/L ADMA여내피생장훈세포작용48 h,류식세포의검측세포조망솔,DAPI염색급AnnexinV/PI쌍염관찰조망세포핵형태변화.재도치현미경하관찰계수중점부세포수래측정세포점부능력.용특이성적 phospho-p38MAPK항체적Western blotting검측p38MAPK적활성.결과:채용첩벽법배양적세포구유다충내피세포특성.ADMA(1-30 μmol/L)유도내피생장훈세포적조망(P<0.01),동시ADMA(5-30 μmol/L)사phospho-p38MAPK단백표체증가,량자작용균정농도의뢰성.ADMA작용조화대조조상비,격광공취초현미경하가견경현저적세포조망형태학개변.제1 μmol/L ADMA외,5、10、30 μmol/L ADMA균가억제내피생장훈세포적점부능력.결론:ADMA능유도내피생장훈세포발생조망병억제기점부능력,ADMA유도내피생장훈세포발생조망가능여p38 MAPK린산화수평상승유관.
