水产学报
水產學報
수산학보
JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA
2001年
2期
127-130
,共4页
中国对虾%微卫星%聚合酶链式反应
中國對蝦%微衛星%聚閤酶鏈式反應
중국대하%미위성%취합매련식반응
运用PCR法在中国对虾的小片段基因组文库中快速筛选含有微卫星序列的重组阳性克隆.PCR中使用的引物为载体pGEM-3zf(+)上多克隆位点两侧的T2/Sp6启动子引物和根据微卫星核心重复序列设计的STR引物:STR1:5'-ATATATATATATAT-3';STR2:5'-TCTCTCTCTCTCTC-3'.直接使用含有重组克隆的菌液,在PCR反应前增加一段裂解细菌的高温.筛选出来的含有微卫星序列的重组阳性克隆经DNA测序验证.结果证明,采用PCR方法用菌液快速筛选含有微卫星序列的重组阳性克隆完全可行,而且具有简便、快速、高效、不涉及同位素操作等优点.
運用PCR法在中國對蝦的小片段基因組文庫中快速篩選含有微衛星序列的重組暘性剋隆.PCR中使用的引物為載體pGEM-3zf(+)上多剋隆位點兩側的T2/Sp6啟動子引物和根據微衛星覈心重複序列設計的STR引物:STR1:5'-ATATATATATATAT-3';STR2:5'-TCTCTCTCTCTCTC-3'.直接使用含有重組剋隆的菌液,在PCR反應前增加一段裂解細菌的高溫.篩選齣來的含有微衛星序列的重組暘性剋隆經DNA測序驗證.結果證明,採用PCR方法用菌液快速篩選含有微衛星序列的重組暘性剋隆完全可行,而且具有簡便、快速、高效、不涉及同位素操作等優點.
운용PCR법재중국대하적소편단기인조문고중쾌속사선함유미위성서렬적중조양성극륭.PCR중사용적인물위재체pGEM-3zf(+)상다극륭위점량측적T2/Sp6계동자인물화근거미위성핵심중복서렬설계적STR인물:STR1:5'-ATATATATATATAT-3';STR2:5'-TCTCTCTCTCTCTC-3'.직접사용함유중조극륭적균액,재PCR반응전증가일단렬해세균적고온.사선출래적함유미위성서렬적중조양성극륭경DNA측서험증.결과증명,채용PCR방법용균액쾌속사선함유미위성서렬적중조양성극륭완전가행,이차구유간편、쾌속、고효、불섭급동위소조작등우점.
