CAJ | 학술논문

目的:基于热休克信号响应和分泌型碱性磷酸酶(SEAP)报告基因,建立HSE-SEAP-HeLa细胞模型,预测重金属(汞及其化合物)的早期毒性.方法:将pHSE-SEAP质粒转染到人子宫颈癌HeLa细胞中,建立瞬时HSE-SEAP响应模型.热休克(42℃,1 h)或重金属化合物(CdCl2,5 μmol·L-1,4 h)处理后,在完全DMEM培养基中恢复48h后,检测细胞上清液中的分泌型碱性磷酸酶的含量(表示该状态下细胞中的热休克蛋白表达量),同时用MTT方法检测对应浓度下的细胞活性,以验证模型的有效性和重复性.并用亚致死浓度(由MTT实验确定)的无机和矿物汞(HgCl2,HgS和朱砂)和柳硫汞钠处理细胞,检测诱导的细胞热休克响应.结果:热休克和CdCl2作用HSE-SEAP-HeLa细胞模型后,细胞上清液中的分泌型碱性磷酸酶的含量显著升高;热休克蛋白表达早于Cd2+对细胞活性的降低.4种汞化合物在亚致死浓度均诱导细胞内热休克蛋白的变化,但4种化合物的作用时间和浓度效应不同,显示不同类型的汞化合物早期毒性存在差异.结论:HSE-SEAP-HeLa细胞模型可有效检测重金属诱导的热休克应激作用,并具有良好的重复性,可应用于重金属有关的早期毒性预测或药物毒性评估.
목적:기우열휴극신호향응화분비형감성린산매(SEAP)보고기인,건립HSE-SEAP-HeLa세포모형,예측중금속(홍급기화합물)적조기독성.방법:장pHSE-SEAP질립전염도인자궁경암HeLa세포중,건립순시HSE-SEAP향응모형.열휴극(42℃,1 h)혹중금속화합물(CdCl2,5 μmol·L-1,4 h)처리후,재완전DMEM배양기중회복48h후,검측세포상청액중적분비형감성린산매적함량(표시해상태하세포중적열휴극단백표체량),동시용MTT방법검측대응농도하적세포활성,이험증모형적유효성화중복성.병용아치사농도(유MTT실험학정)적무궤화광물홍(HgCl2,HgS화주사)화류류홍납처리세포,검측유도적세포열휴극향응.결과:열휴극화CdCl2작용HSE-SEAP-HeLa세포모형후,세포상청액중적분비형감성린산매적함량현저승고;열휴극단백표체조우Cd2+대세포활성적강저.4충홍화합물재아치사농도균유도세포내열휴극단백적변화,단4충화합물적작용시간화농도효응불동,현시불동류형적홍화합물조기독성존재차이.결론:HSE-SEAP-HeLa세포모형가유효검측중금속유도적열휴극응격작용,병구유량호적중복성,가응용우중금속유관적조기독성예측혹약물독성평고.