CAJ | 학술논문

目的:筛选辐射诱导的支气管上皮细胞恶性转化模型中的差异表达基因.方法:应用抑制差减杂交方法(SSH)构建辐射诱导的细胞转化模型差异表达基因的cDNA文库.对差减文库进行PCR筛选,对得到的差异片段进行测序及BLAST分析;对部分筛选出来的差异表达基因使用荧光定量PCR方法检测并确认其变化;将新的序列表达标签(EST)登录到GenBank上.结果:在80个进行测序的克隆中,得到确定序列的共73个.在转化细胞中表达下降的序列41条,BLAST比较分析结果:得到已知序列6条;未知基因的EST序列20条;空载体序列7条;8条为重复测定序列.在转化细胞中表达上升的序列32条,BLAST分析:已知序列14条;未知基因的EST序列9条;重复测定的序列9条.对其中的部分基因改变进行荧光定量PCR检测,结果表明辐射转化组中MY06、HACE1、ZNF143、HNRPH1的表达量明显增加(与对照组相比,转化组中的mRNA分别增加了3.49、29.38、12.99、5.00倍);而PCBP2、RPL15、TCERG1的表达量下降(与对照组相比,转化组中的mRNA分别减少了1.89、48.77、11.95倍).将得到的29个未知序列登录到GenBank,序列ID:EB643220～EB643248.结论:利用抑制差减杂交方法成功建立了恶性转化细胞模型差异表达cDNA文库,包含大量功能未知的新基因;ZNF143表达增加,其与细胞的增殖与分裂有关,TCERG1作为转录辅助激活因子在mRNA转录和后期的修饰过程中起到重要的作用,PCBP2是一个Polyc连接蛋白,具有蛋白翻译调节功能,这些基因在辐射致癌中尚无研究报道.
목적:사선복사유도적지기관상피세포악성전화모형중적차이표체기인.방법:응용억제차감잡교방법(SSH)구건복사유도적세포전화모형차이표체기인적cDNA문고.대차감문고진행PCR사선,대득도적차이편단진행측서급BLAST분석;대부분사선출래적차이표체기인사용형광정량PCR방법검측병학인기변화;장신적서렬표체표첨(EST)등록도GenBank상.결과:재80개진행측서적극륭중,득도학정서렬적공73개.재전화세포중표체하강적서렬41조,BLAST비교분석결과:득도이지서렬6조;미지기인적EST서렬20조;공재체서렬7조;8조위중복측정서렬.재전화세포중표체상승적서렬32조,BLAST분석:이지서렬14조;미지기인적EST서렬9조;중복측정적서렬9조.대기중적부분기인개변진행형광정량PCR검측,결과표명복사전화조중MY06、HACE1、ZNF143、HNRPH1적표체량명현증가(여대조조상비,전화조중적mRNA분별증가료3.49、29.38、12.99、5.00배);이PCBP2、RPL15、TCERG1적표체량하강(여대조조상비,전화조중적mRNA분별감소료1.89、48.77、11.95배).장득도적29개미지서렬등록도GenBank,서렬ID:EB643220～EB643248.결론:이용억제차감잡교방법성공건립료악성전화세포모형차이표체cDNA문고,포함대량공능미지적신기인;ZNF143표체증가,기여세포적증식여분렬유관,TCERG1작위전록보조격활인자재mRNA전록화후기적수식과정중기도중요적작용,PCBP2시일개Polyc련접단백,구유단백번역조절공능,저사기인재복사치암중상무연구보도.