中国矫形外科杂志
中國矯形外科雜誌
중국교형외과잡지
THE ORTHOPEDIC JOURNAL OF CHINA
2009年
12期
931-934
,共4页
胡伟华%陈安民%郭风劲%李锋%黄晖%张伟凯
鬍偉華%陳安民%郭風勁%李鋒%黃暉%張偉凱
호위화%진안민%곽풍경%리봉%황휘%장위개
骨骺干细胞%Sox9%骨髓基质细胞%转染
骨骺榦細胞%Sox9%骨髓基質細胞%轉染
골후간세포%Sox9%골수기질세포%전염
[目的] 从永生化骨骺干细胞中克隆Sox9基因并构建真核表达载体,并探讨Sox9诱导骨髓基质细胞向骨骺干细胞分化的可能性.[方法]以RT-PCR方法获得Sox9全长,插入pGEM-T Easy克隆载体中,测序正确后与pEGFP-IRES2表达载体酶切后连接,复合质粒以脂质体法转染骨髓基质细胞,观察转染效率,Sox9和 FGFR-3的表达.流式细胞术鉴定细胞表型,MTT法检测细胞增殖活性.[结果]成功的完成了Sox9的扩增和表达载体的构建 ,重组载体转染骨髓基质细胞后能检测到Sox9、FGFR-3的表达,增殖活性与骨骺干细胞无异.[结论]成功构建了Sox9真核表达载体,其能诱导骨髓基质细胞分化为骨骺干细胞并具有其特性.
[目的] 從永生化骨骺榦細胞中剋隆Sox9基因併構建真覈錶達載體,併探討Sox9誘導骨髓基質細胞嚮骨骺榦細胞分化的可能性.[方法]以RT-PCR方法穫得Sox9全長,插入pGEM-T Easy剋隆載體中,測序正確後與pEGFP-IRES2錶達載體酶切後連接,複閤質粒以脂質體法轉染骨髓基質細胞,觀察轉染效率,Sox9和 FGFR-3的錶達.流式細胞術鑒定細胞錶型,MTT法檢測細胞增殖活性.[結果]成功的完成瞭Sox9的擴增和錶達載體的構建 ,重組載體轉染骨髓基質細胞後能檢測到Sox9、FGFR-3的錶達,增殖活性與骨骺榦細胞無異.[結論]成功構建瞭Sox9真覈錶達載體,其能誘導骨髓基質細胞分化為骨骺榦細胞併具有其特性.
[목적] 종영생화골후간세포중극륭Sox9기인병구건진핵표체재체,병탐토Sox9유도골수기질세포향골후간세포분화적가능성.[방법]이RT-PCR방법획득Sox9전장,삽입pGEM-T Easy극륭재체중,측서정학후여pEGFP-IRES2표체재체매절후련접,복합질립이지질체법전염골수기질세포,관찰전염효솔,Sox9화 FGFR-3적표체.류식세포술감정세포표형,MTT법검측세포증식활성.[결과]성공적완성료Sox9적확증화표체재체적구건 ,중조재체전염골수기질세포후능검측도Sox9、FGFR-3적표체,증식활성여골후간세포무이.[결론]성공구건료Sox9진핵표체재체,기능유도골수기질세포분화위골후간세포병구유기특성.
