中国药学杂志
中國藥學雜誌
중국약학잡지
CHINESE PHARMACEUTICAL JOURNAL
2004年
3期
185-188
,共4页
郑旭煦%欧阳克清%高虹%许治良%胡应和%蔡绍皙
鄭旭煦%歐暘剋清%高虹%許治良%鬍應和%蔡紹皙
정욱후%구양극청%고홍%허치량%호응화%채소석
NMU2R受体%报告基因%激动剂%高通量药物筛选
NMU2R受體%報告基因%激動劑%高通量藥物篩選
NMU2R수체%보고기인%격동제%고통량약물사선
目的建立神经介素Neuromedin U 2 Receptor(NMU2R)激动剂的高通量筛选模型,从中药中筛选NMU2R受体激动剂.方法将人NMU2R受体基因质粒(hNMU2R/pCDNA3.1)与报告基因质粒(MRE/CRE/LUC)按1:5的比例共转染到HEK293细胞,通过G,418筛选,建立稳定的hNMU2R受体激动剂筛选细胞株.利用CRE的激活剂Forskolin和NMU2R内源激动剂Neuromedin U探索和优化荧光素酶表达时间、每孔细胞数目、荧光素酶底物浓度等筛选条件,建立可靠的筛选方法,并对部分中药水提液进行筛选.结果已建立了一个稳定的hNMU2R受体激动剂筛选细胞株和可靠的筛选方法,其Z'-因子为0.75,荧光素酶表达时间为6～8 h,细胞密度为每孔4×104～8×104个.结论该系统能够有效地应用于NMU2R受体激动剂的高通量筛选,能从中药中筛选出NMU2R受体的激动剂.
目的建立神經介素Neuromedin U 2 Receptor(NMU2R)激動劑的高通量篩選模型,從中藥中篩選NMU2R受體激動劑.方法將人NMU2R受體基因質粒(hNMU2R/pCDNA3.1)與報告基因質粒(MRE/CRE/LUC)按1:5的比例共轉染到HEK293細胞,通過G,418篩選,建立穩定的hNMU2R受體激動劑篩選細胞株.利用CRE的激活劑Forskolin和NMU2R內源激動劑Neuromedin U探索和優化熒光素酶錶達時間、每孔細胞數目、熒光素酶底物濃度等篩選條件,建立可靠的篩選方法,併對部分中藥水提液進行篩選.結果已建立瞭一箇穩定的hNMU2R受體激動劑篩選細胞株和可靠的篩選方法,其Z'-因子為0.75,熒光素酶錶達時間為6～8 h,細胞密度為每孔4×104～8×104箇.結論該繫統能夠有效地應用于NMU2R受體激動劑的高通量篩選,能從中藥中篩選齣NMU2R受體的激動劑.
목적건립신경개소Neuromedin U 2 Receptor(NMU2R)격동제적고통량사선모형,종중약중사선NMU2R수체격동제.방법장인NMU2R수체기인질립(hNMU2R/pCDNA3.1)여보고기인질립(MRE/CRE/LUC)안1:5적비례공전염도HEK293세포,통과G,418사선,건립은정적hNMU2R수체격동제사선세포주.이용CRE적격활제Forskolin화NMU2R내원격동제Neuromedin U탐색화우화형광소매표체시간、매공세포수목、형광소매저물농도등사선조건,건립가고적사선방법,병대부분중약수제액진행사선.결과이건립료일개은정적hNMU2R수체격동제사선세포주화가고적사선방법,기Z'-인자위0.75,형광소매표체시간위6～8 h,세포밀도위매공4×104～8×104개.결론해계통능구유효지응용우NMU2R수체격동제적고통량사선,능종중약중사선출NMU2R수체적격동제.
